低溫誘導(dǎo)球等鞭金藻3011脂肪酸去飽和酶基因片段的篩選及mRNA表達(dá)分析
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【摘要】:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)設(shè)計(jì)特異引物序列,對(duì)經(jīng)低溫誘導(dǎo)處理的球等鞭金藻3011的脂肪酸去飽和酶基因片段進(jìn)行篩選,以實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)酶的表達(dá)量,探索低溫對(duì)該多不飽和脂肪酸脫飽和酶基因表達(dá)量的影響。結(jié)果表明:用prime5設(shè)計(jì)包括內(nèi)參基因在內(nèi)的14條引物,其中7條引物具有特異性擴(kuò)增,根據(jù)擴(kuò)增效果對(duì)其擴(kuò)增體系進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明:Des4、Des5、Des6、Des8、Des9和Des12 m RNA相對(duì)最大表達(dá)量分別為7.71、11.33、42.58、22.02、73.91和16.01。隨溫度的降低均呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)。根據(jù)SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)分析,6個(gè)基因在其m RNA相對(duì)表達(dá)量最大的誘導(dǎo)時(shí)間時(shí),18℃的m RNA相對(duì)表達(dá)量與其在12、15、21℃3個(gè)溫度條件下的相對(duì)表達(dá)量相比具有極顯著差異(P0.01)。18℃條件下誘導(dǎo)24 h可以有效增加Des9基因在球等鞭金藻3011中的表達(dá)。此研究結(jié)果為人為調(diào)控微藻的多不飽和脂肪酸含量提供了一條可行的方法。
【作者單位】: 天津商業(yè)大學(xué)生物技術(shù)與食品科學(xué)學(xué)院天津市食品生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 低溫 脂肪酸去飽和酶 球等鞭金藻 實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 基因表達(dá)
【基金】:天津市高等學(xué)?萍及l(fā)展基金計(jì)劃項(xiàng)目(20120603) 國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31270050;31071522;31171674)
【分類號(hào)】:Q943.2
【正文快照】: 引文格式:王婷,趙培,李楠,等.低溫誘導(dǎo)球等鞭金藻3011脂肪酸去飽和酶基因片段的篩選及m RNA表達(dá)分析[J].食品科學(xué),2016,37(5):132-137.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201605024.http://www.spkx.net.cnWANG Ting,ZHAO Pei,LI Nan,et al.m RNA Expression analysis and screening
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,本文編號(hào):652769
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