為建立一種快速鑒定抗草甘膦轉(zhuǎn)基因油菜的方法,以抗草甘膦轉(zhuǎn)基因油菜品系及后代分離群體為研究材料,利用不同草甘膦濃度濾紙平板進行種子發(fā)芽,觀察抗性材料和非抗性材料幼胚抗性反應(yīng)表型,并通過PCR和苗期草甘膦處理進行抗性驗證。結(jié)果表明,利用0.5～1 g/L的草甘膦溶液處理的抗性材料胚根根毛生長正常,而非抗性材料胚根生長遲緩且光滑無根毛;利用該濃度的處理BC₁和F₂抗性分離群體,幼胚根毛有無性狀分離比符合1:1和3:1,幼胚個體的基因組PCR擴增結(jié)果與根毛有無呈共分離。通過觀察在該濃度草甘膦發(fā)芽處理后的幼胚根毛有無,可有效區(qū)分抗草甘膦轉(zhuǎn)基因油菜的抗性和非抗性材料。本研究建立的鑒定方法不僅能夠?qū)共莞熟⒂筒瞬牧线M行快速、準確鑒定,而且能保證材料成活,對抗草甘膦轉(zhuǎn)基因油菜育種和種子純度鑒定提供技術(shù)參考。

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【部分圖文】：

圖1 群體共分離油菜胚根的發(fā)芽狀況

以FMV35S為引物擴增ZJ抗油菜品系，PCR陽性和非陽性單株數(shù)比值為6:7；以GOX引物擴增ZJ抗油菜品系，PCR陽性和非陽性單株數(shù)比值為5:8；以FMV35S引物擴增103469-4群體的PCR陽性和非陽性單株數(shù)比值為9:4；以GOX引物擴增103469-4群體的PCR陽性和....

圖4 抗草甘膦的供試材料根毛基因組PCR分析

圖3供試材料幼胚基因組PCR擴增結(jié)果3討論與結(jié)論

圖2 草甘膦濃度為1.00 g/L條件下供試材料胚根的發(fā)芽狀況

對長有根毛的BC1和F2提取DNA，進行PCR，瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果均表現(xiàn)為陽性，且噴施除草劑草甘膦后未發(fā)現(xiàn)有死亡現(xiàn)象，這些結(jié)果說明草甘膦濃度為0.50～1.00g/L時，幼胚長有根毛的油菜種子含有抗除草劑基因，且苗期對草甘膦表現(xiàn)為抗性（圖4）。圖3供試材料幼胚基因組PCR擴增....

圖3 供試材料幼胚基因組PCR擴增結(jié)果

圖2草甘膦濃度為1.00g/L條件下供試材料胚根的發(fā)芽狀況圖4抗草甘膦的供試材料根毛基因組PCR分析

本文編號：4026316