基于紫外誘變與生物合成基因簇倍增的多氧霉素高產(chǎn)菌株構(gòu)建
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【部分圖文】:
圖2 鏈霉菌S.ansochromogenes Pol-12的基因組及其限制性內(nèi)切酶Bsr DⅠ酶切產(chǎn)物M—Takara DL10 000 DNA Marker;1—S.ansochromogenes Pol-12的基因組DNA;2—S.ansochromogenes Pol-12基因組DNA的Bsr DⅠ酶切產(chǎn)物
來(lái)源于噬菌體的Red/ET重組酶可以在大腸桿菌中介導(dǎo)一個(gè)線性DNA分子和一個(gè)環(huán)狀DNA分子發(fā)生重組,簡(jiǎn)稱線環(huán)重組(linear-circularhomolo‐gousrecombination,LCHR)。為了方便下一步接合轉(zhuǎn)移和位點(diǎn)特異性元件的插入,將含有篩選標(biāo)記阿泊拉霉素....
圖1 多氧霉素的結(jié)構(gòu)與組成[6]
多氧霉素的化學(xué)結(jié)構(gòu)與幾丁質(zhì)合成酶(chitinsynthase)的底物尿苷二磷酸酯-N-乙酰氨基葡萄糖(UDP-GlcNAc)相似,因而能夠競(jìng)爭(zhēng)性抑制真菌細(xì)胞壁中幾丁質(zhì)的合成,導(dǎo)致細(xì)胞因滲透壓差異而裂解[3-4]。Isono等[3,5-7]將可可鏈霉菌阿蘇變種的發(fā)酵液進(jìn)行多步....
圖3 直接克隆載體的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物
圖2鏈霉菌S.ansochromogenesPol-12的基因組及其限制性內(nèi)切酶BsrDⅠ酶切產(chǎn)物M—TakaraDL10000DNAMarker;1—S.ansochromogenesPol-12的基因組DNA;2—S.ansochromogenesPol-1....
圖4 多氧霉素基因簇的直接克隆
圖3直接克隆載體的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物2.3.2原始啟動(dòng)子、kasOp*啟動(dòng)子以及接合轉(zhuǎn)移和位點(diǎn)特異性整合元件的插入
本文編號(hào):4027589
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