肺癌是發(fā)病率和死亡率較高的惡性腫瘤。由于肺癌早期起病隱匿,大部分患者被診斷時多處于中晚期,易錯過最佳治療時期,五年生存率較低,提高肺癌的診斷率至關重要。目前,臨床診斷肺癌的方法主要有組織細胞學、影像學及血清腫瘤標志物檢查。隨著對腫瘤發(fā)病機制的研究深入,DNA甲基化在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機制備受關注,其中基因組低甲基化和CpG島局部高甲基化可通過介導腫瘤相關基因功能改變誘發(fā)腫瘤。人矮小同源盒基因2（short stature homeobox 2,SHOX2）屬于SHOX基因家族成員,主要編碼蛋白轉錄因子,該基因表達異�；虮碛^遺傳學改變可引起某些疾病。許多研究表明SHOX2基因甲基化與肺癌有關。目前SHOX2基因甲基化檢測主要借助組織活檢,這種方法具有侵入性、風險較大且獲取的腫瘤組織有異質性,而選用液體活檢,對血液或其它體液標本進行SHOX2基因甲基化檢測可彌補組織活檢的缺陷。通常用于SHOX2基因甲基化檢測的方法有甲基化特異性PCR、亞硫酸氫鹽測序和熒光定量PCR。這些方法雖然有較好的靈敏性和特異性,但仍存在一些不足,例如不易從復雜樣品中準確地定量微量的靶核酸。近年來,新型的微滴數字PC...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.1.1ddPCR優(yōu)化退火溫度結果（一維圖：藍色信號代表SHOX2基因甲基化陽性，灰色信號代表陰性）

退火溫度的結果顯示（圖3.1.1），在50℃⁶0℃之間，熒光信低先增強后減弱，當溫度在56.3℃⁵8.3℃范圍時，觀察到陽較明顯，為了提高結果特異性，選擇58℃作為ddPCR檢測S的最適退火溫度。

圖3.1.2.1PCR擴增產物電泳圖譜

圖3.1.2.1PCR擴增產物電泳圖譜（m:600bpLadder，1-2:甲基化對照品，3-4:非甲基化對照，5:空白對照）Figure3.1.2.1ElectrophoreticpatternofPCRproductoftargetgenes(m:600....

圖3.1.3標準品ddPCR檢測結果：一維圖顯示在不同甲基化水平的標準品中SHOX2基因甲基化檢測結果（A）和SHOX2基因甲基化水平（Ratio），誤差線表示泊松95%置信區(qū)間（B）

.1.3標準品ddPCR檢測結果：一維圖顯示在不同甲基化水平的標準品中SHOX2基檢測結果（A）和SHOX2基因甲基化水平（Ratio），誤差線表示泊松95%置信區(qū)間gure3.1.3ddPCRresults:1-Dgraphshowsresulto....

圖3.3.1SHOX2基因甲基化診斷肺癌ROC曲線（肺癌組III/IV期vs正常組）

基因甲基化診斷肺癌ROC曲線（肺癌組III/ofthediagnosisoflungcancerbySHOX2methstageIII/IVlungcancerpatients)甲基化在肺癌中的臨床應用價值疾病組中，肺癌組SHOX2基因甲病組....

本文編號：4026035