目的研究小鼠正畸牙移動(dòng)模型中移動(dòng)牙牙周組織自噬相關(guān)基因的表達(dá),探討自噬在正畸牙移動(dòng)骨塑建中的作用。方法 30只11周齡雄性C57B/6小鼠隨機(jī)分為3組,每組10只。A組構(gòu)建小鼠正畸牙移動(dòng)模型,安放鎳鈦拉簧并施加矯治力;B組放置拉簧但不加矯治力;C組空白組。加力裝置均安放于上頜左側(cè)第一磨牙與左側(cè)切牙之間,加力至第12 d處死小鼠。取左側(cè)上頜骨標(biāo)本,制作左側(cè)上頜第一磨牙牙周組織標(biāo)本切片,采用微計(jì)算機(jī)斷層掃描技術(shù)測(cè)量牙移動(dòng)距離,使用蘇木精-伊紅(HE)染色、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶聯(lián)式反應(yīng)(RT-qPCR)觀察牙移動(dòng)情況,檢測(cè)牙周組織中骨塑建相關(guān)基因[骨保護(hù)因子(OPG)和破骨細(xì)胞核因子κB受體活化因子配體(RANKL)]和自噬相關(guān)基因(包括Atg5、Atg7和Beclin-1)的表達(dá)。結(jié)果 A組平均牙移動(dòng)距離0.09 mm,HE染色顯示A組牙根張力側(cè)與壓力側(cè)的牙周膜間隙不均等,壓力側(cè)細(xì)胞受到擠壓、張力側(cè)細(xì)胞受到拉伸。TRAP染色顯示A組第一磨牙牙根近中側(cè)見(jiàn)到陽(yáng)性破骨細(xì)胞且A組壓力側(cè)破骨細(xì)胞數(shù)大于張力側(cè),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。RT-qPCR顯...

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圖1建立小鼠牙移動(dòng)模型

小鼠經(jīng)腹腔注射10%水合氯醛麻醉,劑量為3.0mL·kg-1。注藥后將小鼠置于22～25℃恒定環(huán)境中保持仰臥狀態(tài),口內(nèi)放入自制開(kāi)口器確保術(shù)野清晰。將定制的0.04N螺旋拉簧拉伸至產(chǎn)生0.04N力的長(zhǎng)度,兩端用結(jié)扎絲分別結(jié)扎于左側(cè)上頜第一磨牙及左側(cè)上頜中切牙處。在切牙結(jié)扎絲....

圖2MicroCT檢測(cè)第一磨牙移動(dòng)情況×400

MicroCT檢測(cè)結(jié)果如圖2所示,磨牙移動(dòng)距離平均值:A組0.09mm,B組0mm,C組0mm。其中A組與B、C組組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2.3HE染色觀察結(jié)果

圖3第一磨牙張壓力側(cè)牙周膜組織形態(tài)觀察HE染色×200

各組牙周膜組織HE染色結(jié)果(圖3)示,B、C兩組牙根張力側(cè)與壓力側(cè)的牙周膜間隙均等,牙根兩側(cè)細(xì)胞無(wú)明顯差異;A組牙根張力側(cè)與壓力側(cè)的牙周膜間隙不均等,牙根兩側(cè)細(xì)胞有差異,壓力側(cè)細(xì)胞受到擠壓,張力側(cè)細(xì)胞受到拉伸。2.4TRAP染色結(jié)果

圖4第一磨牙張壓力側(cè)破骨細(xì)胞觀察TRAP染色×200

TRAP染色觀察結(jié)果如圖4所示,其中破骨細(xì)胞呈酒紅色陽(yáng)性顆粒。B、C組中未見(jiàn)到TRAP染色陽(yáng)性細(xì)胞,A組第一磨牙牙根近中側(cè)見(jiàn)到陽(yáng)性破骨細(xì)胞。如圖5所示,A組組內(nèi)壓力側(cè)破骨細(xì)胞均數(shù)大于張力側(cè),組內(nèi)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);B、C組組內(nèi)近遠(yuǎn)中側(cè)無(wú)明顯差異,組內(nèi)比較差異無(wú)....

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