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恒河猴畢氏腸微孢子蟲基因分型及人畜共患性分析

發(fā)布時(shí)間:2024-04-26 03:52
  畢氏腸微孢子蟲作為一種人畜共患性的機(jī)會(huì)性致病體,目前尚無(wú)安全有效的防治手段,其流行機(jī)制也知之甚少。我國(guó)恒河猴種群數(shù)量眾多,其棲息地環(huán)境復(fù)雜多樣,分析不同生活條件下的恒河猴畢氏腸微孢子蟲感染情況,不僅可以了解其健康狀態(tài),從而進(jìn)行及時(shí)的疫病防控,還可為深入研究畢氏腸微孢子蟲的感染流行機(jī)制提供一定的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。然而目前國(guó)內(nèi)有關(guān)恒河猴畢氏腸微孢子蟲感染情況的報(bào)道較少,已被調(diào)查了解的恒河猴種群數(shù)量也較少,且范圍較窄,難以對(duì)其流行機(jī)制做出有效的分析。本研究在我國(guó)的11個(gè)圈養(yǎng)恒河猴種群、7個(gè)野生、3個(gè)半野生種群中共采集了522個(gè)糞便樣品,以核糖體DNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)序列為分子標(biāo)記,進(jìn)行了畢氏腸微孢子蟲的流行情況調(diào)查、基因分型和人畜共患性分析,主要結(jié)果如下:(1)21個(gè)恒河猴種群中,17個(gè)種群檢測(cè)出畢氏腸微孢子蟲的存在,種群內(nèi)平均感染率為12.5%,表明我國(guó)恒河猴種群中畢氏腸微孢子蟲的流行較為普遍。17個(gè)恒河猴種群中個(gè)體感染率最高可達(dá)56.5%,但大都處于4%-17%之間。比較不同種群的感染差異發(fā)現(xiàn),恒河猴的畢氏腸微孢子蟲感染率可能與該種群和潛在傳播源的接觸程度相關(guān),良好的飼養(yǎng)管理與衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)能有...

【文章頁(yè)數(shù)】:60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1畢氏腸微孢子蟲生活周期圖(引自Mónicaetal2011[17])

圖1.1畢氏腸微孢子蟲生活周期圖(引自Mónicaetal2011[17])

31.2.1生活史與形態(tài)特征畢氏腸微孢子蟲生活史可以劃分為四個(gè)階段:卵塊發(fā)育原形體階段(merogonialplasmodia)、孢子生殖原形體階段(sporogonialplasmodia)、孢子母細(xì)胞階段(unikaryoticsporoblasts)和孢子階段(spores....


圖1.2核糖體DNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)Fig.1.2Internaltranscribedspacers

圖1.2核糖體DNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)Fig.1.2Internaltranscribedspacers

年代以來(lái)分子生物學(xué)的快速發(fā)展,DNA檢測(cè)技術(shù)被廣泛應(yīng)用于生物分類領(lǐng)域[33]。目前寄生蟲分子分類學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用比較廣泛的分子標(biāo)記主要有5.8SrRNA、18SrRNA、28SrRNA及核糖體DNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(internaltranscribedspacers,ITS),由于有著較....


圖2.1樣品采集點(diǎn)分布(褐色圓點(diǎn)表示我國(guó)各省會(huì)城市,綠色點(diǎn)表示圈養(yǎng)種群采樣點(diǎn),藍(lán)色點(diǎn)表

圖2.1樣品采集點(diǎn)分布(褐色圓點(diǎn)表示我國(guó)各省會(huì)城市,綠色點(diǎn)表示圈養(yǎng)種群采樣點(diǎn),藍(lán)色點(diǎn)表

18樣品采集過程中遵循以下原則:(1)避免破壞性取樣(destructivesampling),所有樣品均為恒河猴糞便樣品;(2)保證樣品的新鮮,每個(gè)采樣點(diǎn)持續(xù)觀察,一旦發(fā)現(xiàn)動(dòng)物排糞,立即采集,并利用干冰進(jìn)行冷凍保存。(3)采集過程中穿戴隔離口罩與一次性無(wú)菌手套,并用一次性無(wú)菌手....


圖3.1畢氏腸微孢子蟲ITS序列電泳檢測(cè)結(jié)果(M代表DNAMarkerD,1-21代表被檢查樣品,0表示空白對(duì)照

圖3.1畢氏腸微孢子蟲ITS序列電泳檢測(cè)結(jié)果(M代表DNAMarkerD,1-21代表被檢查樣品,0表示空白對(duì)照

213.結(jié)果與分析3.1畢氏腸微孢子蟲ITS序列擴(kuò)增結(jié)果用濃度為1.5%的瓊脂糖凝膠對(duì)實(shí)驗(yàn)中的第一次PCR結(jié)果進(jìn)行電泳檢測(cè),在凝膠成像系統(tǒng)中觀察未發(fā)現(xiàn)明顯的可見條帶。說(shuō)明第一次PCR所得產(chǎn)物含量較低,需進(jìn)行第二次擴(kuò)增以提高目的片段的擴(kuò)增數(shù)量。用濃度為1.5%的瓊脂糖凝膠對(duì)第二次P....



本文編號(hào):3964668

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