我國設(shè)施作物生產(chǎn)中土壤營養(yǎng)元素失衡,土壤呈現(xiàn)酸化趨勢是一個較為嚴(yán)重的問題。土壤酸化會增加可溶性鋁的含量,抑制植物正常生長和損害其生理功能。植物體內(nèi)合成的鋁激活蘋果酸轉(zhuǎn)運蛋白(ALMT1)能促進(jìn)根系蘋果酸的分泌,從而緩解植物受鋁離子的脅迫。因此ALMT1在調(diào)節(jié)蘋果酸分泌和植物對鋁脅迫耐受的過程中起著關(guān)鍵作用。為深入研究植物耐鋁基因ALMT1表達(dá)的調(diào)控機(jī)制,本研究通過誘導(dǎo)獲得對鋁脅迫不敏感的擬南芥突變體,鑒定和篩選參與鋁脅迫信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和AtALMT1表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子的相關(guān)基因。主要研究結(jié)果為:利用甲基磺酸乙酯(EMS)誘導(dǎo)攜帶綠色熒光蛋白(GFP)AtALMT1啟動子的轉(zhuǎn)基因擬南芥,使其產(chǎn)生突變且引起AtALMT1的表達(dá)異常,篩選出7個對鋁不敏感的擬南芥突變體。通過對比鋁離子脅迫擬南芥突變體與野生型的表型差異,發(fā)現(xiàn)突變體在根和下胚軸生長上受抑制的程度不同,其中MDI下胚軸長度受到顯著抑制,MD4、MD5、MD6、MD7則顯著抑制根系生長,而MD2和MD8未能觀察到生長明顯受抑制。通過檢測7個突變體的蘋果酸釋放量、AtALMT1表達(dá)量及鋁脅迫相關(guān)基因(CAMTA2、STOP1、ALS3、MATE)...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１擬南芥種子種植網(wǎng)?

ｍｍｍＪｕｒｎｍｒｎｍ＾??圖２－１擬南芥種子種植網(wǎng)?圖２－２水培擬南芥幼苗??Ｆｉｇ．?２－１?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ?ｓｅｅｄｓ?ｐｌａｎｔｅｄ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｍｅｓｈ?Ｆｉｇ．?２－２?Ｈｙｄｒｏｐｏｎｉｃ?ｏｆ?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ?ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ??２．?１．４熒....

圖２－５收集擬南芥根系分泌的蘋果酸??：ＭＧＲＬ４

廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文?錯不敏感型擬南芥突變體的特征分析及突變基因篩選??（Ｈｏｅｋｅｎｇａ扣義，２００３）。蘋果酸的測量采用有機(jī)酸酶循環(huán)法（圖２－６；附錄１），所有實??驗至少重復(fù)三次并計算均值和方差值（Ｔａｋｉｔａ?ｅｈ／．，?１９９９）。??丨?１?％?，：雕??ｒ＾ｕ?＇?....

圖２－６酶循環(huán)法測量蘋果酸含量原理圖??注：通過ＭＤＨ將蘋果酸轉(zhuǎn)化為ＮＡＤＨ（上）

廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文?錯不敏感型擬南芥突變體的特征分析及突變基因篩選??（Ｈｏｅｋｅｎｇａ扣義，２００３）。蘋果酸的測量采用有機(jī)酸酶循環(huán)法（圖２－６；附錄１），所有實??驗至少重復(fù)三次并計算均值和方差值（Ｔａｋｉｔａ?ｅｈ／．，?１９９９）。??丨?１?％?，：雕??ｒ＾ｕ?＇?....

圖２－７轉(zhuǎn)基因擬南芥中攜帶綠色熒光蛋白（ＧＦＰ）?ＪＭＺＭ７７啟動子的模型??

２．?２．?１擬南芥突變體的表達(dá)??初代擬南芥突變體（Ｍｌ）來自ＥＭＳ誘變實驗和初步綠色熒光篩選。擬南芥ＪＭＬＭ７７??啟動子攜帶綠色熒光蛋白（ＧＦＰ）（圖２－７），通過甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ）誘變使其耐鋁??基因ＪＭＬＭ７７表達(dá)異常，從而篩選出７個綠色熒光不明顯的Ｍ２代鋁不敏感型....

本文編號：3958099