發(fā)布時間：2024-04-17 18:22

　　玉米是動物飼料的主要原料,但玉米籽粒中高活性的α-生育酚含量較低,而且玉米籽粒中的磷主要是以有機磷—植酸磷的形式存在,單胃動物不能有效吸收利用。因此,飼料中需要添加合成的DL-α-生育酚醋酸酯和無機磷或者微生物來源的植酸酶來滿足動物生長發(fā)育的需要,這使得飼料成本大大增加,而且未被消化的植酸磷還會隨動物糞便排出體外造成磷污染。為此,本研究構(gòu)建了多基因串聯(lián)表達(dá)載體,利用農(nóng)桿菌侵染法轉(zhuǎn)化玉米,獲得了維生素E含量和植酸酶酶活均提高、且具有草銨膦抗性的轉(zhuǎn)基因玉米材料,并對轉(zhuǎn)基因玉米的分子特征、農(nóng)藝性狀以及籽粒營養(yǎng)成分等進(jìn)行了分析。主要結(jié)果如下:1、構(gòu)建了含有多基因表達(dá)盒的表達(dá)載體pCAMBIA3301ZTAO和pCAMBIA3301ZTGHAO,載體pCAMBIA3301ZTAO含有胚特異性啟動子13387驅(qū)動、Glb1終止子終止的玉米γ-生育酚甲基轉(zhuǎn)移酶基因ZmTMT表達(dá)盒,胚乳特異性啟動子123387驅(qū)動、LEG1終止子終止的植酸酶基因AO表達(dá)盒和組成型啟動子CaMV35S驅(qū)動、CaMV35S polyA終止子終止的草銨膦抗性基因Bar表達(dá)盒三個表達(dá)盒;載體pCAMBIA3301ZTGHAO...

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1維生素E合成途徑（DELLAPENNA,2005；DELLAPENNAetal.,2011）

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第一章緒論2圖1-1維生素E合成途徑（DELLAPENNA,2005；DELLAPENNAetal.,2011）Figure1-1PathwayofvitaminEbiosynthesis（DELLAPENNA,2005；DELLAPENNAetal.,....

圖1-2技術(shù)路線

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第一章緒論9物利用率也僅為天然α-生育酚的五分之一左右（MARUSICHetal.,1967；CHENGetal.,2016）。而目前，國際市場上植酸酶占飼料酶市場總量的40％，高達(dá)30萬噸以上，對于標(biāo)準(zhǔn)化為5000FTU/g的產(chǎn)品（工業(yè)植酸酶制劑的濃度....

圖3-1pCAMBIA3301ZTAO載體圖譜

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第三章結(jié)果與分析30第三章結(jié)果與分析3.1轉(zhuǎn)ZmTMT和AO基因玉米植株的獲得和鑒定3.1.1載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)基因植株的獲得通過目的基因ZmTMT和AO的酶切和連接獲得pCAMBIA3301ZTAO植物表達(dá)載體，如圖3-1所示。其中ZmTMT由玉米胚特異啟動....

圖3-2ZTAO轉(zhuǎn)基因玉米的篩選和鑒定Figure3-2ScreeningandidentificationofZTAOtransgenicmaize.A、B、C：依次分別為目的基因Bar、ZmTMT、AO的PCR檢測結(jié)果；1-6：事件ZTAO-1#的純系植株；7-12：事件ZTAO-2#的純系植株；M：1kbDNA分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第三章結(jié)果與分析31為了得到ZTAO的轉(zhuǎn)基因純系材料，噴灑草銨膦后葉片全為綠色的轉(zhuǎn)基因玉米，進(jìn)一步進(jìn)行PCR鑒定。ZTAO-1#和ZTAO-2#轉(zhuǎn)基因材料中Bar、ZmTMT、AO基因的PCR檢測結(jié)果如圖3-2所示，Bar基因以bar-F和bar-R作為....

本文編號：3956743