發(fā)布時間：2024-04-16 21:10

　　目的:分子靶向治療由于其安全性和有效性等特點,已被應用在包括非小細胞肺癌(Non small cell lung cancer,NSCLC)在內(nèi)的多種腫瘤的臨床治療中。吉非替尼是第一個獲批上市的表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑,臨床應用取得了較好的療效,已成為EGFR基因突變的晚期NSCLC患者的一線治療方案。但是多數(shù)患者會在接受吉非替尼治療一段時間后出現(xiàn)耐藥的現(xiàn)象。MicroRNA能夠通過沉默其靶基因參與幾乎所有的生理或病理性生物學功能的調(diào)控。近期的研究發(fā)現(xiàn),多種microRNAs參與了NSCLC中吉非替尼耐藥性的形成和維持。本研究擬構(gòu)建NSCLC吉非替尼耐藥的microRNA-靶點調(diào)控網(wǎng)絡。并明確miR-342-3p在NSCLC細胞對吉非替尼耐藥性的形成和調(diào)節(jié)中的作用以及相關(guān)的分子機制,從而為闡明NSCLC的分子靶向治療耐藥的機制提供新依據(jù)。方法:1.整合分析NSCLC表達譜的數(shù)據(jù)集,鑒定差異表達基因。2.對差異表達基因進行GO功能注釋及KEGG富集分析。3.構(gòu)建NSCLC吉非替尼耐藥的microRNA-靶點調(diào)控網(wǎng)絡。4.A549和PC9以及吉非替尼耐藥的A549/GR和PC9/G...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略語
第一部分 :綜合網(wǎng)絡分析法鑒定非小細胞肺癌潛在的與吉非替尼耐藥性相關(guān)的micro RNAS及其靶點
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 研究對象
        2.2 生物信息學分析方法
            2.2.1 差異表達基因(differentially expressed gene,DEG)的鑒定
            2.2.2 功能及富集分析
            2.2.3 Micro RNA-靶點調(diào)控網(wǎng)絡的構(gòu)建
    3 結(jié)果
        3.1 吉非替尼耐藥的NSCLC中上調(diào)的差異表達基因的鑒定及功能研究
        3.2 MICRORNA-靶點調(diào)控網(wǎng)絡的構(gòu)建
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 :MIR-342-3P靶向沉默CAP4 基因增強肺癌細胞對吉非替尼的耐藥性
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 實驗材料
            2.1.1 實驗用細胞株
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 主要實驗儀器
            2.1.4 生物信息學和計算機分析軟件包
            2.1.5 常見試劑配制
        2.2 實驗方法
            2.2.1 細胞培養(yǎng)
            2.2.2 建立NSCLC吉非替尼耐藥細胞株
            2.2.3 實時定量PCR
            2.2.4 細胞轉(zhuǎn)染及實驗分組
            2.2.5 藥物敏感性實驗
            2.2.6 雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?br>            2.2.7 Western Blotting
        2.3 實驗統(tǒng)計方法
    3 結(jié)果
        3.1 MIR-342-3P促進A549/GR和 PC9/GR細胞對吉非替尼的耐藥性
        3.2 CPA4在NSCLC細胞中是MIR-342-3P的一個靶基因
        3.3 MIR-342-3P通過沉默CPA4 提高A549/GR和 PC9/GR細胞對吉非替尼的耐藥性
    4 討論
    5 結(jié)論
本論文創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3956690