目的:分子靶向治療由于其安全性和有效性等特點,已被應(yīng)用在包括非小細胞肺癌(Non small cell lung cancer,NSCLC)在內(nèi)的多種腫瘤的臨床治療中。吉非替尼是第一個獲批上市的表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑,臨床應(yīng)用取得了較好的療效,已成為EGFR基因突變的晚期NSCLC患者的一線治療方案。但是多數(shù)患者會在接受吉非替尼治療一段時間后出現(xiàn)耐藥的現(xiàn)象。MicroRNA能夠通過沉默其靶基因參與幾乎所有的生理或病理性生物學(xué)功能的調(diào)控。近期的研究發(fā)現(xiàn),多種microRNAs參與了NSCLC中吉非替尼耐藥性的形成和維持。本研究擬構(gòu)建NSCLC吉非替尼耐藥的microRNA-靶點調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。并明確miR-342-3p在NSCLC細胞對吉非替尼耐藥性的形成和調(diào)節(jié)中的作用以及相關(guān)的分子機制,從而為闡明NSCLC的分子靶向治療耐藥的機制提供新依據(jù)。方法:1.整合分析NSCLC表達譜的數(shù)據(jù)集,鑒定差異表達基因。2.對差異表達基因進行GO功能注釋及KEGG富集分析。3.構(gòu)建NSCLC吉非替尼耐藥的microRNA-靶點調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。4.A549和PC9以及吉非替尼耐藥的A549/GR和PC9/G...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略語
第一部分 :綜合網(wǎng)絡(luò)分析法鑒定非小細胞肺癌潛在的與吉非替尼耐藥性相關(guān)的micro RNAS及其靶點
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 研究對象
        2.2 生物信息學(xué)分析方法
            2.2.1 差異表達基因(differentially expressed gene,DEG)的鑒定
            2.2.2 功能及富集分析
            2.2.3 Micro RNA-靶點調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建
    3 結(jié)果
        3.1 吉非替尼耐藥的NSCLC中上調(diào)的差異表達基因的鑒定及功能研究
        3.2 MICRORNA-靶點調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 :MIR-342-3P靶向沉默CAP4 基因增強肺癌細胞對吉非替尼的耐藥性
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 實驗材料
            2.1.1 實驗用細胞株
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 主要實驗儀器
            2.1.4 生物信息學(xué)和計算機分析軟件包
            2.1.5 常見試劑配制
        2.2 實驗方法
            2.2.1 細胞培養(yǎng)
            2.2.2 建立NSCLC吉非替尼耐藥細胞株
            2.2.3 實時定量PCR
            2.2.4 細胞轉(zhuǎn)染及實驗分組
            2.2.5 藥物敏感性實驗
            2.2.6 雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?br>            2.2.7 Western Blotting
        2.3 實驗統(tǒng)計方法
    3 結(jié)果
        3.1 MIR-342-3P促進A549/GR和 PC9/GR細胞對吉非替尼的耐藥性
        3.2 CPA4在NSCLC細胞中是MIR-342-3P的一個靶基因
        3.3 MIR-342-3P通過沉默CPA4 提高A549/GR和 PC9/GR細胞對吉非替尼的耐藥性
    4 討論
    5 結(jié)論
本論文創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3956690