晝夜節(jié)律影響動物多種生理過程,包括心血管系統(tǒng)功能、能量代謝、免疫、細(xì)胞再生和激素分泌。從生物節(jié)律變化角度,研究激素配體-受體和生物鐘調(diào)控雞子宮部前列腺素F受體基因(PTGFR)表達(dá)變化規(guī)律的成因,分析時鐘基因和前列腺激素(PGF_2α)對激素受體基因表達(dá)的影響,闡述時鐘基因和PTGFR基因之間的潛在調(diào)控關(guān)系,具有重要科學(xué)意義。本研究以羅曼蛋雞為材料,選擇育成期和產(chǎn)蛋高峰時期雞只,分析不同生理狀態(tài)下子宮組織形態(tài)學(xué)變化規(guī)律。檢測血液中前列腺素(PGs)、雌二醇(E₂)、促卵泡素(FSH)和黃體生成素(LH)含量的動態(tài)變化和激素受體基因以及時鐘基因表達(dá)量的變化規(guī)律。體外培養(yǎng)原代子宮上皮細(xì)胞,經(jīng)免疫組化鑒定后為上皮細(xì)胞,測定細(xì)胞生長曲線;進(jìn)行不同濃度梯度的激素處理,CCK8檢測激素對子宮上皮細(xì)胞體外增殖的影響;并用siRNA干擾上皮細(xì)胞中核心時鐘基因Bmal1,實(shí)時熒光定量檢測時鐘基因Bmal1和Per2、時控基因Rev-erb以及PGF_2α激素受體基因PTGFR的表達(dá)水平,同時探索PGF_2α對時鐘基因表達(dá)的...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 雌禽性腺軸、繁殖器官及其功能
        1.1.1 雌禽的下丘腦-垂體-性腺軸
        1.1.2 雌禽的繁殖器官
        1.1.3 禽類輸卵管子宮部的組織結(jié)構(gòu)
        1.1.4 禽類輸卵管子宮部的功能
    1.2 雞排卵與產(chǎn)蛋規(guī)律
        1.2.1 蛋雞的規(guī)律性排卵
        1.2.2 蛋雞產(chǎn)蛋的連續(xù)性
    1.3 生物鐘與時鐘基因
        1.3.1 生物節(jié)律
        1.3.2 生物鐘的核心組成單元
        1.3.3 時鐘基因調(diào)控生物節(jié)律的分子機(jī)制
    1.4 性腺激素及其生理作用
        1.4.1 促卵泡素FSH
        1.4.2 黃體生成素LH
        1.4.3 雌激素E2

    1.5 前列腺素激素及其受體的研究進(jìn)展
        1.5.1 前列腺素PGs
        1.5.2 前列腺素受體
    1.6 本研究的目的意義和主要內(nèi)容
        1.6.1 研究的目的意義
        1.6.2 研究的主要內(nèi)容
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 試驗(yàn)動物
        2.1.2 試驗(yàn)試劑
        2.1.3 常用試劑的配制
        2.1.4 試驗(yàn)主要儀器設(shè)備
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 血液激素的測定
        2.2.2 子宮組織HE染色
        2.2.3 組織中相關(guān)基因的熒光定量
        2.2.4 子宮上皮細(xì)胞試驗(yàn)
    2.3 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 試驗(yàn)雞只連產(chǎn)情況及試驗(yàn)材料篩選
    3.2 雞血液生殖激素含量及生殖激素受體基因的表達(dá)變化
        3.2.1 血液四種生殖激素含量的晝夜變化
        3.2.2 雞生殖激素受體基因的晝夜表達(dá)變化
    3.3 雞育成期和產(chǎn)蛋期輸卵管子宮部時鐘基因的晝夜表達(dá)變化
    3.4 雞輸卵管子宮組織的晝夜形態(tài)學(xué)變化
        3.4.1 子宮組織的HE染色結(jié)果
        3.4.2 子宮組織的晝夜形態(tài)學(xué)變化
    3.5 雞輸卵管子宮部上皮細(xì)胞的培養(yǎng)和鑒定結(jié)果
        3.5.1 雞輸卵管子宮部上皮細(xì)胞的培養(yǎng)結(jié)果
        3.5.2 原代雞子宮上皮細(xì)胞的免疫組化技術(shù)鑒定結(jié)果
    3.6 前列腺素PGF_2α和雌激素E2對雞子宮上皮細(xì)胞增殖的影響
    3.7 前列腺素PGF_2α對雞子宮上皮細(xì)胞前列腺素F受體蛋白表達(dá)的影響
    3.8 前列腺素PGF_2α對激素受體基因PTGFR和時鐘基因表達(dá)的影響
    3.9 干擾時鐘基因Bmal1 對前列腺素受體基因PTGFR表達(dá)的影響
        3.9.1 雞子宮上皮細(xì)胞發(fā)條機(jī)制的建立
        3.9.2 最佳干擾片段篩選結(jié)果
        3.9.3 干擾時鐘基因?qū)ψ訉m上皮細(xì)胞PTGFR基因表達(dá)的影響
4 討論
    4.1 蛋雞育成期和產(chǎn)蛋高峰期生殖激素含量及激素受體表達(dá)量的變化
        4.1.1 育成期和產(chǎn)蛋高峰期生殖激素含量變化
        4.1.2 育成期與產(chǎn)蛋高峰期激素受體的表達(dá)量變化
    4.2 蛋雞育成期和產(chǎn)蛋高峰期時鐘基因表達(dá)量變化
    4.3 生殖激素對雞子宮上皮細(xì)胞增殖和對時鐘基因表達(dá)的影響
        4.3.1 PGF_2α和 E₂對子宮上皮細(xì)胞增殖的影響
        4.3.2 PGF_2α激素處理對子宮上皮細(xì)胞中Bmal1和Per2 基因表達(dá)的影響
    4.4 時鐘基因?qū)﹄u子宮上皮細(xì)胞PTGFR基因表達(dá)的影響
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷



本文編號：3946914

suoshi