目的建立并鑒定脂肪組織特異性CREG基因敲除(AKO)小鼠。方法首先將CREG flox純合子小鼠(基因型CREG^fl/fl)與脂肪組織特異性Cre工具鼠[基因型Adipoq-Cre⁽Tg(+))]交配。然后將獲得的脂肪組織表達Cre的CREG flox雜合子小鼠[基因型CREG^fl/wt:Adipoq-Cre⁽Tg(+))]與CREG^fl/fl小鼠交配獲得子代小鼠。第4周時采用熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)鑒定基因型,并計算不同基因型小鼠比例。采用PCR及Western Blot方法鑒定小鼠脂肪組織及心肌組織CREG轉(zhuǎn)錄及蛋白水平表達。結(jié)果共交配成功11只孕鼠,基因型鑒定82只子代小鼠。AKO小鼠[基因型CREG^fl/fl:Adipoq-Cre⁽Tg(+))]20只,CREG^fl/fl小鼠22只,符合孟德爾遺傳定律。AKO小鼠脂肪組織CREG轉(zhuǎn)錄和蛋白水平均顯著低于CREG^fl/fl小鼠...

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圖1AKO小鼠繁育策略

以CREGfl/fl小鼠為對照組,定量PCR檢測AKO小鼠脂肪組織及心肌組織CREG轉(zhuǎn)錄水平表達。AKO小鼠脂肪組織CREG轉(zhuǎn)錄水平為(0.06±0.01),顯著低于CREGfl/fl小鼠的(1.02±0.13),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);CREGfl/fl、AKO小鼠心....

圖24種基因型小鼠代表性鑒定結(jié)果

圖1AKO小鼠繁育策略圖3CREGfl/fl、AKO小鼠脂肪及心肌組織CREG轉(zhuǎn)錄水平表達

圖3CREGfl/fl、AKO小鼠脂肪及心肌組織CREG轉(zhuǎn)錄水平表達

圖24種基因型小鼠代表性鑒定結(jié)果2.3AKO小鼠脂肪組織CREG蛋白水平表達

圖4CREGfl/fl、AKO小鼠脂肪及心肌組織CREG蛋白表達

以CREGfl/fl小鼠為對照組,Westernblot法檢測AKO小鼠脂肪組織及心肌組織CREG蛋白水平表達。AKO小鼠脂肪組織CREG蛋白表達為(0.04±0.01),顯著低于CREGfl/fl小鼠的(1.01±0.21),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);CREGfl/f....

本文編號：3911907