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生物節(jié)律鐘基因LHY、CCA1調(diào)控擬南芥營養(yǎng)生長時相轉(zhuǎn)變的研究

發(fā)布時間:2024-02-14 01:41
  高等植物的生長發(fā)育是一個復(fù)雜的過程,可劃分為營養(yǎng)生長和生殖生長兩個階段,其中營養(yǎng)生長階段又可分為幼齡期和成熟期,而幼齡期(juvenile stage)到成熟期(adult phase)的轉(zhuǎn)變被稱為營養(yǎng)生長時相轉(zhuǎn)變(vegetative phase change,VPC)。VPC是植株生長過程中不可缺少的過程,受基因表達的調(diào)控。VPC與葉片形態(tài)學(xué)、細胞學(xué)以及分子層面上的變化有相關(guān)聯(lián)系。其中遠軸面表皮毛的出現(xiàn)常常作為VPC出現(xiàn)標(biāo)志;莖頂端分生組織的凸起程度可作為劃分幼齡期到成熟期的分界線;VPC與小分子RNA-miR156與靶基因SPL3表達水平的變化相聯(lián)系。植物體內(nèi)存在一個生物鐘控制機制,在長期進化過程中,生物鐘隨環(huán)境及晝夜變化的影響,從而完成植物的生長發(fā)育進程,調(diào)控生物鐘的內(nèi)在循環(huán)機制叫做生物節(jié)律鐘(circadian clock)。盡管生物節(jié)律鐘的研究比較透徹,但生物節(jié)律鐘基因?qū)χ仓闢PC的作用還有待深入研究。本研究以擬南芥生物節(jié)律鐘基因雙突變體thycca1以及LHY、CCA1超表達植株為研究對象,分別通過形態(tài)學(xué)、細胞學(xué)和分子層面進行研究并分析生物節(jié)律鐘基因LHY、CCA1對VP...

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞
第一章 前言
    1.1 模式植物擬南芥
    1.2 植物的生長發(fā)育階段
    1.3 營養(yǎng)生長時相轉(zhuǎn)變
    1.4 莖頂端分生組織
    1.5 營養(yǎng)生長時相轉(zhuǎn)變分子機制
    1.6 生物節(jié)律鐘
    1.7 研究目的及意義
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗方法
        2.2.1 材料培養(yǎng)
        2.2.2 LHY、CCA1基因表達載體的構(gòu)建
        2.2.3 LHY、CCA1轉(zhuǎn)基因植株的獲取
        2.2.4 轉(zhuǎn)基因植株的檢測
        2.2.5 擬南芥形態(tài)學(xué)觀察
        2.2.6 制作石蠟切片
        2.2.7 半定量與熒光定量PCR
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 LHY、CCA1基因的擴增
    3.2 LHY、CCA1重組質(zhì)粒的提取和雙酶切
    3.3 表達載體的連接
    3.4 35S::LHY、35S::CCA1轉(zhuǎn)基因植株篩選
    3.5 35S::LHY、35S::CCA1轉(zhuǎn)基因植株的鑒定
        3.5.1 35S::LHY轉(zhuǎn)基因植株的鑒定
        3.5.2 35S::CCA1轉(zhuǎn)基因植株的鑒定
    3.6 植株形態(tài)學(xué)觀察
        3.6.1 葉形分析及出現(xiàn)遠軸面表皮毛的蓮座葉
        3.6.2 植株生長速率
        3.6.3 葉片長寬比
        3.6.4 葉基角
    3.7 莖頂端分生組織結(jié)構(gòu)特征
    3.8 miR156及SPL3表達分析
        3.8.1 半定量PCR
        3.8.2 熒光定量PCR
第四章 討論
    4.1 植株形態(tài)學(xué)變化與VPC的關(guān)系
    4.2 莖頂端分生組織的變化與VPC的關(guān)系
    4.3 miR156和SPL3表達情況與VPC的關(guān)系
    4.4 生物節(jié)律鐘基因與VPC的關(guān)系
參考文獻
致謝
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本文編號:3897540

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