豬流行性腹瀉病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)是一種可引起豬嚴(yán)重腹瀉的豬腸道疾病,屬于Ⅰ類冠狀病毒。其發(fā)病主要特征是急性水樣下痢、脫水和嘔吐等癥狀,仔豬感染該病毒后具有很高的死亡率,并給養(yǎng)豬行業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。近幾年來,隨著分子生物學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展,人們對(duì)PEDV的基因結(jié)構(gòu)、基因功能及致病分子機(jī)理,甚至對(duì)該病毒的檢測(cè)以及預(yù)防疫苗等方面都有比較大的突破。雖然有了非常更深入的認(rèn)識(shí),但是對(duì)于全面控制PEDV的流行仍處在初步的研究階段。本論文的研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:1.本試驗(yàn)利用生物學(xué)軟件和在線數(shù)據(jù)庫中篩選出PEDV S2基因的B細(xì)胞表位,并通過Overlap PCR方法將其嵌入到嗜酸乳桿菌的S-層蛋白基因中,獲得融合基因SLP-EpitopeS2。然后將融合基因SLP-EpitopeS2導(dǎo)入到原核表達(dá)載體pGEX-4T-3中,成功構(gòu)建出了原核表達(dá)載體pGEX-SLP-EpitopeS2。2.通過PCR擴(kuò)增、雙酶切及基因測(cè)序結(jié)果證明融合表達(dá)載體pGEX-SLP-EpitopeS2的正確性。SDS-PAGE結(jié)果證明融合蛋白SLP-EpitopeS...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

圖１冠狀病毒的結(jié)構(gòu)模型圖??Ｆｉｇ．?１?ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｍｏｄｅｌ?ｐｉｃｔｕｒｅ?ｏｆ?Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ??

圖２?Ｏｖｅｒｌａｐ?ＰＣＲ技術(shù)原理圖??Ｆｉｇ．２?Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｏｆ?Ｏｖｅｒｌａｐ?ＰＣＲ??注：圖中ＳＬＰ為Ｓ－層蛋白，Ｂ?Ｅｐｉｔｏｐｅ為Ｂ細(xì)胞秦位肽基因??

圖6p6〔X一SLp一印itopeSZ里組質(zhì)粒酶切鑒足與用序結(jié)果

圖7重組蛋白pGEX一SLP一Ep{topeSZ的SDS一PAGE和Westernblot鑒定結(jié)果

本文編號(hào)：3887062