豬流行性腹瀉病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)是一種可引起豬嚴重腹瀉的豬腸道疾病,屬于Ⅰ類冠狀病毒。其發(fā)病主要特征是急性水樣下痢、脫水和嘔吐等癥狀,仔豬感染該病毒后具有很高的死亡率,并給養(yǎng)豬行業(yè)帶來了巨大的經濟損失。近幾年來,隨著分子生物學技術的飛速發(fā)展,人們對PEDV的基因結構、基因功能及致病分子機理,甚至對該病毒的檢測以及預防疫苗等方面都有比較大的突破。雖然有了非常更深入的認識,但是對于全面控制PEDV的流行仍處在初步的研究階段。本論文的研究內容及結果如下:1.本試驗利用生物學軟件和在線數據庫中篩選出PEDV S2基因的B細胞表位,并通過Overlap PCR方法將其嵌入到嗜酸乳桿菌的S-層蛋白基因中,獲得融合基因SLP-EpitopeS2。然后將融合基因SLP-EpitopeS2導入到原核表達載體pGEX-4T-3中,成功構建出了原核表達載體pGEX-SLP-EpitopeS2。2.通過PCR擴增、雙酶切及基因測序結果證明融合表達載體pGEX-SLP-EpitopeS2的正確性。SDS-PAGE結果證明融合蛋白SLP-EpitopeS...

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【學位級別】：碩士

圖１冠狀病毒的結構模型圖??Ｆｉｇ．?１?ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｍｏｄｅｌ?ｐｉｃｔｕｒｅ?ｏｆ?Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ??

圖２?Ｏｖｅｒｌａｐ?ＰＣＲ技術原理圖??Ｆｉｇ．２?Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｏｆ?Ｏｖｅｒｌａｐ?ＰＣＲ??注：圖中ＳＬＰ為Ｓ－層蛋白，Ｂ?Ｅｐｉｔｏｐｅ為Ｂ細胞秦位肽基因??

圖6p6〔X一SLp一印itopeSZ里組質粒酶切鑒足與用序結果

圖7重組蛋白pGEX一SLP一Ep{topeSZ的SDS一PAGE和Westernblot鑒定結果

本文編號：3887062