目的:阿爾茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)是世界范圍內(nèi)一種常見的癡呆癥。AD的主要特征是β-淀粉樣蛋白(β-amyloid peptides,Aβ)沉積形成的老年斑和過度磷酸化Tau蛋白為核心形成的神經(jīng)原纖維纏結(jié)(neurofibrillary tangle,NFT)。近年來,多個研究表明腦金屬代謝紊亂與神經(jīng)退行性疾病有關(guān),腦鐵增高及鐵代謝調(diào)控分子的失衡可能在AD發(fā)病過程中起著重要作用,鐵的異常代謝將引起神經(jīng)毒性,并在海馬以及其他與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)區(qū)域聚集形成活性氧,最終引起神經(jīng)元死亡。二價(jià)金屬轉(zhuǎn)運(yùn)體DMT1(divalent metal transporter,DMT1)是一種維持細(xì)胞內(nèi)二價(jià)金屬離子穩(wěn)態(tài)的金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,它是腸上皮細(xì)胞和紅細(xì)胞中鐵離子的主要轉(zhuǎn)運(yùn)體,有研究表明DMT1與多種神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病密切相關(guān)。本研究在明確APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠大腦中DMT1表達(dá)和分布的基礎(chǔ)上,探討DMT1基因?qū)PP及其相關(guān)水解酶表達(dá)的影響,以及Aβ_1-42寡聚體對過表達(dá)DMT1的神經(jīng)瘤母細(xì)胞的毒性作用。方法:1、應(yīng)用免疫熒光雙標(biāo)染色法檢測DMT1...

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料及分組
    2.2 主要試劑與儀器
        2.2.1 主要試劑
        2.2.2 主要儀器設(shè)備
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 Aβ1-42寡聚體的制備
        2.3.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.3 CCK8檢測Aβ1-42寡聚體對細(xì)胞生長狀態(tài)
        2.3.4 免疫印跡
        2.3.5 免疫熒光
        2.3.6 細(xì)胞Heochst33258染色
        2.3.7 細(xì)胞Clacein-AM染色
        2.3.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
3 結(jié)果
    3.1 DMT1在APP/PS1 小鼠大腦皮層和海馬老年斑中的分布與表達(dá)
    3.2 DMT1在APPsw細(xì)胞與neo細(xì)胞中的表達(dá)與分布
    3.3 DMT1在SH-SY5Y細(xì)胞中過表達(dá)
    3.4 DMT1對于APP蛋白及其水解酶的影響
    3.5 Aβ_1-42寡聚體作用條件的確定
    3.6 DMT1在Aβ_1-42寡聚體抑制細(xì)胞活性中的作用
    3.7 DMT1通過調(diào)節(jié)凋亡蛋白的表達(dá)加重Aβ_1-42寡聚體的毒性作用
    3.8 DMT1通過調(diào)節(jié)自噬蛋白的表達(dá)加重Aβ_1-42寡聚體的毒性作用
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新的自我評價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3885830