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Oct4和Sall4基因在小鼠體細胞重編程中的作用機制研究

發(fā)布時間:2023-12-24 19:49
  誘導多能干細胞技術(shù)是指在已經(jīng)分化的體細胞中同時過表達幾種關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄因子將分化的體細胞轉(zhuǎn)化為一種多能干細胞的技術(shù)。通過這個技術(shù)獲得的多能性的細胞稱為誘導多能干細胞(iPSCs)。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)過表達一些轉(zhuǎn)錄因子的組合可以使小鼠的成纖維細胞轉(zhuǎn)變?yōu)檎T導多能干細胞。這些轉(zhuǎn)錄因子的組合包括最初Yamanaka等人提出的OSK體系(Oct4、Sox2、Klf4)、Buganim等人提出的SNEL體系(Sall4、Nanog、Esrrb、Lin28)、Liu等人提出的KISLG(Kdm2b、Id1、Sall4、Lrh1和Glis1)體系和Wang等人提出的7F體系(Jdp2、Kdm2b、Mkk6、Nanog、Esrrb、Glis1、Sall4)。在這些體系中,我們發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子Oct4和Sall4是不可或缺的,說明這兩個因子在重編程中發(fā)揮了關(guān)鍵性的作用。Oct4在維持胚胎干細胞的多能性和自我更新方面起到了重要的作用。Oct4在胚胎發(fā)育過程中的表達伴隨著細胞的多能性。Sall4與Oct4一樣在在胚胎干細胞的增殖和多能性維持方面發(fā)揮了重要的作用。在胚胎發(fā)育過程中,Sall4調(diào)控Oct4的表達,使Oct4的表...

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
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英文摘要
前言
    1.小鼠胚胎干細胞
    2.體細胞重編程中轉(zhuǎn)錄因子的可選擇性
    3.轉(zhuǎn)錄因子Oct4/Sall4 的背景介紹
        3.1 OCT4蛋白的結(jié)構(gòu)以及表達模式
        3.2 Oct4基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控
        3.3 SALL4蛋白的結(jié)構(gòu)與表達
        3.4 Sall4基因的表達調(diào)控
        3.5 Sall4基因與多能性的關(guān)系
    4.組學測序與生物信息學分析
        4.1 RNA-seq技術(shù)
        4.2 ATAC-seq技術(shù)
    5.總結(jié)和展望
材料和方法
    1.材料
        1.1 細胞及動物來源
        1.2 主要試劑和儀器
        1.3 主要細胞培養(yǎng)液
    2.實驗方法
        2.1 MEF的分離
        2.2 磷酸鈣轉(zhuǎn)染
        2.3 小鼠誘導多能干細胞技術(shù)
        2.4 RNA提取
        2.5 RNA-seq建庫技術(shù)
        2.6 RNA-seq 數(shù)據(jù)分析
        2.7 ATAC-seq建庫測序
        2.8 ATAC-seq數(shù)據(jù)分析
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
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致謝



本文編號:3875197

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