Oct4和Sall4基因在小鼠體細胞重編程中的作用機制研究
發(fā)布時間:2023-12-24 19:49
誘導多能干細胞技術(shù)是指在已經(jīng)分化的體細胞中同時過表達幾種關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄因子將分化的體細胞轉(zhuǎn)化為一種多能干細胞的技術(shù)。通過這個技術(shù)獲得的多能性的細胞稱為誘導多能干細胞(iPSCs)。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)過表達一些轉(zhuǎn)錄因子的組合可以使小鼠的成纖維細胞轉(zhuǎn)變?yōu)檎T導多能干細胞。這些轉(zhuǎn)錄因子的組合包括最初Yamanaka等人提出的OSK體系(Oct4、Sox2、Klf4)、Buganim等人提出的SNEL體系(Sall4、Nanog、Esrrb、Lin28)、Liu等人提出的KISLG(Kdm2b、Id1、Sall4、Lrh1和Glis1)體系和Wang等人提出的7F體系(Jdp2、Kdm2b、Mkk6、Nanog、Esrrb、Glis1、Sall4)。在這些體系中,我們發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子Oct4和Sall4是不可或缺的,說明這兩個因子在重編程中發(fā)揮了關(guān)鍵性的作用。Oct4在維持胚胎干細胞的多能性和自我更新方面起到了重要的作用。Oct4在胚胎發(fā)育過程中的表達伴隨著細胞的多能性。Sall4與Oct4一樣在在胚胎干細胞的增殖和多能性維持方面發(fā)揮了重要的作用。在胚胎發(fā)育過程中,Sall4調(diào)控Oct4的表達,使Oct4的表...
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
1.小鼠胚胎干細胞
2.體細胞重編程中轉(zhuǎn)錄因子的可選擇性
3.轉(zhuǎn)錄因子Oct4/Sall4 的背景介紹
3.1 OCT4蛋白的結(jié)構(gòu)以及表達模式
3.2 Oct4基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控
3.3 SALL4蛋白的結(jié)構(gòu)與表達
3.4 Sall4基因的表達調(diào)控
3.5 Sall4基因與多能性的關(guān)系
4.組學測序與生物信息學分析
4.1 RNA-seq技術(shù)
4.2 ATAC-seq技術(shù)
5.總結(jié)和展望
材料和方法
1.材料
1.1 細胞及動物來源
1.2 主要試劑和儀器
1.3 主要細胞培養(yǎng)液
2.實驗方法
2.1 MEF的分離
2.2 磷酸鈣轉(zhuǎn)染
2.3 小鼠誘導多能干細胞技術(shù)
2.4 RNA提取
2.5 RNA-seq建庫技術(shù)
2.6 RNA-seq 數(shù)據(jù)分析
2.7 ATAC-seq建庫測序
2.8 ATAC-seq數(shù)據(jù)分析
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
參考文獻
在讀期間發(fā)表的論文
致謝
本文編號:3875197
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【學位級別】:碩士
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英文摘要
前言
1.小鼠胚胎干細胞
2.體細胞重編程中轉(zhuǎn)錄因子的可選擇性
3.轉(zhuǎn)錄因子Oct4/Sall4 的背景介紹
3.1 OCT4蛋白的結(jié)構(gòu)以及表達模式
3.2 Oct4基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控
3.3 SALL4蛋白的結(jié)構(gòu)與表達
3.4 Sall4基因的表達調(diào)控
3.5 Sall4基因與多能性的關(guān)系
4.組學測序與生物信息學分析
4.1 RNA-seq技術(shù)
4.2 ATAC-seq技術(shù)
5.總結(jié)和展望
材料和方法
1.材料
1.1 細胞及動物來源
1.2 主要試劑和儀器
1.3 主要細胞培養(yǎng)液
2.實驗方法
2.1 MEF的分離
2.2 磷酸鈣轉(zhuǎn)染
2.3 小鼠誘導多能干細胞技術(shù)
2.4 RNA提取
2.5 RNA-seq建庫技術(shù)
2.6 RNA-seq 數(shù)據(jù)分析
2.7 ATAC-seq建庫測序
2.8 ATAC-seq數(shù)據(jù)分析
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
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