誘導(dǎo)多能干細(xì)胞技術(shù)是指在已經(jīng)分化的體細(xì)胞中同時(shí)過表達(dá)幾種關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄因子將分化的體細(xì)胞轉(zhuǎn)化為一種多能干細(xì)胞的技術(shù)。通過這個(gè)技術(shù)獲得的多能性的細(xì)胞稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSCs)。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)過表達(dá)一些轉(zhuǎn)錄因子的組合可以使小鼠的成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)檎T導(dǎo)多能干細(xì)胞。這些轉(zhuǎn)錄因子的組合包括最初Yamanaka等人提出的OSK體系(Oct4、Sox2、Klf4)、Buganim等人提出的SNEL體系(Sall4、Nanog、Esrrb、Lin28)、Liu等人提出的KISLG(Kdm2b、Id1、Sall4、Lrh1和Glis1)體系和Wang等人提出的7F體系(Jdp2、Kdm2b、Mkk6、Nanog、Esrrb、Glis1、Sall4)。在這些體系中,我們發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子Oct4和Sall4是不可或缺的,說明這兩個(gè)因子在重編程中發(fā)揮了關(guān)鍵性的作用。Oct4在維持胚胎干細(xì)胞的多能性和自我更新方面起到了重要的作用。Oct4在胚胎發(fā)育過程中的表達(dá)伴隨著細(xì)胞的多能性。Sall4與Oct4一樣在在胚胎干細(xì)胞的增殖和多能性維持方面發(fā)揮了重要的作用。在胚胎發(fā)育過程中,Sall4調(diào)控Oct4的表達(dá),使Oct4的表...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
    1.小鼠胚胎干細(xì)胞
    2.體細(xì)胞重編程中轉(zhuǎn)錄因子的可選擇性
    3.轉(zhuǎn)錄因子Oct4/Sall4 的背景介紹
        3.1 OCT4蛋白的結(jié)構(gòu)以及表達(dá)模式
        3.2 Oct4基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控
        3.3 SALL4蛋白的結(jié)構(gòu)與表達(dá)
        3.4 Sall4基因的表達(dá)調(diào)控
        3.5 Sall4基因與多能性的關(guān)系
    4.組學(xué)測(cè)序與生物信息學(xué)分析
        4.1 RNA-seq技術(shù)
        4.2 ATAC-seq技術(shù)
    5.總結(jié)和展望
材料和方法
    1.材料
        1.1 細(xì)胞及動(dòng)物來源
        1.2 主要試劑和儀器
        1.3 主要細(xì)胞培養(yǎng)液
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 MEF的分離
        2.2 磷酸鈣轉(zhuǎn)染
        2.3 小鼠誘導(dǎo)多能干細(xì)胞技術(shù)
        2.4 RNA提取
        2.5 RNA-seq建庫技術(shù)
        2.6 RNA-seq 數(shù)據(jù)分析
        2.7 ATAC-seq建庫測(cè)序
        2.8 ATAC-seq數(shù)據(jù)分析
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表的論文
致謝



本文編號(hào)：3875197