RNase T2家族中Class I基因在植物生長發(fā)育和逆境脅迫中發(fā)揮著重要作用。通過查找擬南芥RNS1在棗上的同源蛋白,設(shè)計引物克隆獲取了棗ZjRNase1基因。該基因包含3個外顯子和2個內(nèi)含子,cDNA全長為681 bp,其編碼蛋白包含226個氨基酸,與番茄、擬南芥和水稻中的Class I蛋白具有高度相似的保守域。該蛋白含有信號肽,屬于分泌蛋白。通過ZjRNase1基因?qū)崟r定量PCR分析發(fā)現(xiàn),該基因表達具有組織特異性,在莖、葉、花中的表達量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于果實和根。將棗ZjRNase1基因轉(zhuǎn)入擬南芥,轉(zhuǎn)基因植株葉片發(fā)生明顯卷曲現(xiàn)象,初步明確了該基因參與葉片發(fā)育過程。本研究可為后續(xù)棗RNase T2家族中Class I基因研究提供參考。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗材料
    1.2 試驗方法
        1.2.1棗ZjRNase1基因的克隆
        1.2.2生物信息學(xué)分析
        1.2.3基因的表達分析
        1.2.4過表達載體的構(gòu)建PCR獲得基因片段
        1.2.5擬南芥的遺傳轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)基因鑒定
2 結(jié)果和分析
    2.1 棗ZjRNase1基因的克隆及結(jié)構(gòu)分析
    2.2 棗ZjRNase1基因的理化性質(zhì)分析及亞細(xì)胞定位
    2.3 棗ZjRNase1蛋白的保守結(jié)構(gòu)域分析
    2.4 棗ZjRNase1基因的組織特異性分析
    2.5 棗ZjRNase1基因的遺傳轉(zhuǎn)化分析
        2.5.1重組載體的構(gòu)建
        2.5.2轉(zhuǎn)基因擬南芥植株表型特征
3 討論與結(jié)論



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