發(fā)布時(shí)間：2023-11-23 20:57

　　繡球花(Hydrangea macrophylla)為虎耳草科繡球?qū)傩」嗄�。不同品種的繡球花花色花型各異,極具觀賞價(jià)值,廣泛應(yīng)用于庭院栽培、園林景觀設(shè)計(jì)及鮮切花材料中�；ㄉ怯^賞植物最重要的特征之一,闡明花色相關(guān)的調(diào)控途徑對(duì)新品種的培育具有重要的理論意義。為了探究繡球花不同花色的形成機(jī)制,本課題組前期完成了 3個(gè)不同繡球花品種的不同顏色萼片的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序。分析轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果發(fā)現(xiàn),繡球花DFR(二氫黃酮醇-4-還原酶)基因家族的表達(dá)豐度與花色關(guān)系密切,其中編號(hào)為Cluster-33435.81339的轉(zhuǎn)錄本與花色的深淺程度呈現(xiàn)顯著正相關(guān)。本研究克隆了該轉(zhuǎn)錄本的全長(zhǎng)序列,證實(shí)其編碼一個(gè)繡球花中的二氫黃酮醇-4-還原酶,將其命名為HmDFR。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR,分析了該基因在3個(gè)品種的繡球花的根、莖、葉、芽及不同發(fā)育時(shí)期的萼片中的表達(dá)模式,結(jié)合花色苷含量進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析,探討HmDFR基因在繡球花3個(gè)品種花色形成過程中發(fā)揮的功能。本研究的主要結(jié)果如下:1.‘繡球’、‘無盡夏’、‘伊米莉亞’萼片的花色苷含量測(cè)定。通過觀察3個(gè)品種繡球花萼片的顏色變化,將其按照顏色深淺程度劃分為6個(gè)不同的發(fā)育階段,...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 引言
    1.1 繡球花簡(jiǎn)介
        1.1.1 繡球花形態(tài)特征
        1.1.2 繡球花資源分布
        1.1.3 繡球花觀賞應(yīng)用價(jià)值
    1.2 繡球花的國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展
    1.3 植物花色概述
        1.3.1 花瓣色素組成
        1.3.2 花色苷的生物合成途徑
        1.3.3 花色苷生物合成途徑相關(guān)基因在花色改良中的應(yīng)用
    1.4 課題來源與依據(jù)
        1.4.1 課題來源
        1.4.2 課題依據(jù)
    1.5 研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線
        1.5.1 研究?jī)?nèi)容
        1.5.2 技術(shù)路線
2 繡球花萼片不同發(fā)育時(shí)期的花色苷含量分析
    2.1 材料
        2.1.1 供試材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
    2.2 測(cè)定原理
    2.3 方法
    2.4 數(shù)據(jù)處理
    2.5 結(jié)果
        2.5.1 繡球花萼片的形態(tài)特征變化
        2.5.2 繡球花萼片不同發(fā)育時(shí)期花色苷含量
    2.6 討論
3 繡球花HmDFR基因的克隆及生物信息學(xué)分析
    3.1 材料
        3.1.1 供試材料
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.3 主要試劑配制
        3.1.4 菌株及載體
        3.1.5 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
    3.2 方法
        3.2.1 基因組DNA提取
        3.2.2 植物總RNA提取
        3.2.3 cDNA反轉(zhuǎn)錄
        3.2.4 克隆引物設(shè)計(jì)
        3.2.5 PCR體系構(gòu)建
        3.2.6 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物回收
        3.2.7 A-T克隆
        3.2.8 陽性篩選及鑒定
        3.2.9 目標(biāo)基因生物信息學(xué)分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 繡球花葉片基因組DNA提取
        3.3.2 繡球花萼片總RNA提取
        3.3.3 繡球花HmDFR基因的克隆
        3.3.4 繡球花HmDFR基因的生物信息學(xué)分析
    3.4 討論
4 HmDFR基因在繡球花中的表達(dá)分析
    4.1 材料
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備
    4.2 方法
        4.2.1 提取各樣品總RNA
        4.2.2 各樣品總RNA檢測(cè)
        4.2.3 實(shí)時(shí)熒光定量特異引物設(shè)計(jì)
        4.2.4 實(shí)時(shí)熒光定量體系及程序
    4.3 數(shù)據(jù)處理
    4.4 結(jié)果
        4.4.1 各樣品總RNA提取
        4.4.2 定量引物特異性檢測(cè)及分析
        4.4.3 HmDFR基因在‘繡球’根、莖、葉、芽及萼片不同發(fā)育時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量
        4.4.4 HmDFR基因在‘無盡夏’根、莖、葉、芽及萼片不同發(fā)育時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量
        4.4.5 HmDFR基因在‘伊米莉亞’根、莖、葉、芽及萼片不同發(fā)育時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量
    4.5 花色與HmDFR基因表達(dá)的相關(guān)性分析
    4.6 討論
5 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 研究展望
參考文獻(xiàn)
附錄 A (攻讀學(xué)位期間的主要學(xué)術(shù)成果)
致謝



本文編號(hào)：3866199