該研究以桂花‘日香桂’花瓣為材料,采用RT-PCR方法克隆桂花OfRAP2-12基因,并進(jìn)行生物信息學(xué)分析,比較該基因在桂花花香較淡品種‘日香桂’和花香較濃品種‘波葉金桂’不同組織、不同花發(fā)育時(shí)期和日周期的表達(dá)豐度,鑒定其編碼蛋白的亞細(xì)胞定位,進(jìn)一步分析基因表達(dá)與花香物質(zhì)含量的相關(guān)性,以探究其與花香物質(zhì)的關(guān)系,為桂花花香物質(zhì)合成的分子機(jī)制研究奠定基礎(chǔ)。結(jié)果顯示:(1)成功克隆獲得桂花OfRAP2-12基因,所得目的片段長度為1 367 bp,包含一個(gè)長度966 bp的ORF,編碼321個(gè)氨基酸。(2)基因序列和系統(tǒng)發(fā)育分析表明,OfRAP2-12編碼蛋白包含核心真雙子葉植物ERF-B2亞家族RAP2-12保守結(jié)構(gòu)域,其與木犀科物種RAP2-12聚為一支,具有種系特異性。(3)在線預(yù)測結(jié)果顯示,OfRAP2-12蛋白定位在細(xì)胞核中,且主要分布在質(zhì)膜(69%)和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜(64%);構(gòu)建35S∷OfRAP2-12-GFP融合蛋白表達(dá)載體,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法侵染到本氏煙草的葉片下表皮2 d后,激光共聚焦顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn),在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)膜上都能明顯觀測到35S∷OfRAP2-12-GFP融合蛋白的...

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 植物材料
    1.2 方 法
        1.2.1 桂花OfRAP2-12基因的CDS克隆
        1.2.2 桂花OfRAP2-12基因序列分析和表達(dá)分析
        1.2.3 桂花OfRAP2-12基因編碼蛋白的亞細(xì)胞定位試驗(yàn)
        1.2.4 桂花OfRAP2-12基因表達(dá)與花香物質(zhì)釋放規(guī)律的相關(guān)性分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 桂花OfRAP2-12基因的CDS克隆及其編碼蛋白分析
    2.2 桂花OfRAP2-12氨基酸序列比對及系統(tǒng)發(fā)育樹分析
    2.3 桂花OfRAP2-12基因的表達(dá)模式分析
    2.4 桂花OfRAP2-12蛋白的亞細(xì)胞定位
    2.5 桂花OfRAP2-12基因表達(dá)與花香物質(zhì)釋放規(guī)律的相關(guān)性分析
3 討 論



本文編號：3865534