該研究以桂花‘日香桂’花瓣為材料,采用RT-PCR方法克隆桂花OfRAP2-12基因,并進行生物信息學分析,比較該基因在桂花花香較淡品種‘日香桂’和花香較濃品種‘波葉金桂’不同組織、不同花發(fā)育時期和日周期的表達豐度,鑒定其編碼蛋白的亞細胞定位,進一步分析基因表達與花香物質含量的相關性,以探究其與花香物質的關系,為桂花花香物質合成的分子機制研究奠定基礎。結果顯示:(1)成功克隆獲得桂花OfRAP2-12基因,所得目的片段長度為1 367 bp,包含一個長度966 bp的ORF,編碼321個氨基酸。(2)基因序列和系統(tǒng)發(fā)育分析表明,OfRAP2-12編碼蛋白包含核心真雙子葉植物ERF-B2亞家族RAP2-12保守結構域,其與木犀科物種RAP2-12聚為一支,具有種系特異性。(3)在線預測結果顯示,OfRAP2-12蛋白定位在細胞核中,且主要分布在質膜(69%)和內質網膜(64%);構建35S∷OfRAP2-12-GFP融合蛋白表達載體,通過農桿菌介導法侵染到本氏煙草的葉片下表皮2 d后,激光共聚焦顯微鏡觀察發(fā)現,在細胞核和細胞質膜上都能明顯觀測到35S∷OfRAP2-12-GFP融合蛋白的...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 植物材料
    1.2 方 法
        1.2.1 桂花OfRAP2-12基因的CDS克隆
        1.2.2 桂花OfRAP2-12基因序列分析和表達分析
        1.2.3 桂花OfRAP2-12基因編碼蛋白的亞細胞定位試驗
        1.2.4 桂花OfRAP2-12基因表達與花香物質釋放規(guī)律的相關性分析
2 結果與分析
    2.1 桂花OfRAP2-12基因的CDS克隆及其編碼蛋白分析
    2.2 桂花OfRAP2-12氨基酸序列比對及系統(tǒng)發(fā)育樹分析
    2.3 桂花OfRAP2-12基因的表達模式分析
    2.4 桂花OfRAP2-12蛋白的亞細胞定位
    2.5 桂花OfRAP2-12基因表達與花香物質釋放規(guī)律的相關性分析
3 討 論



本文編號：3865534