發(fā)布時(shí)間：2023-10-18 20:04

　　背景:目前,在中國肺癌是發(fā)病率和死亡率位居第一的惡性腫瘤。針對(duì)晚期的非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)治療,分子靶向治療成為研究熱點(diǎn),其中以EML4-ALK融合基為靶點(diǎn)的靶向治療尤其備受關(guān)注。另外,眾多科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)一種新的抑癌基因TGFβRII。大量研究表明,TGFβRII與多數(shù)惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),有研究發(fā)現(xiàn),TGFβRII在腸癌、頭頸癌等惡性腫瘤中表達(dá)異常增高,但也有研究發(fā)現(xiàn)TGFβRII在胃癌、結(jié)直腸癌、肝癌、口腔鱗狀細(xì)胞癌、宮頸癌等癌癥中異常降低并促進(jìn)癌癥發(fā)展。TGFβRII是TGF-β蛋白主要結(jié)合受體蛋白,在細(xì)胞增殖過程中發(fā)揮重要作用,可進(jìn)一步使TGFβR1磷酸化激活TGFβR1上下游相關(guān)通路,調(diào)節(jié)機(jī)體細(xì)胞正常生長凋亡。當(dāng)TGFβ信號(hào)通路異常,機(jī)體內(nèi)發(fā)生多種癌癥危險(xiǎn)性將大大升高。TGFβRII基因表達(dá)異常在直接影響TGFβ信號(hào)通路失調(diào)之外,還可影響Smad等信號(hào)通路、Smad信號(hào)通路在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)DNA轉(zhuǎn)錄功能,一旦受到影響,將激活或抑制某些基因表達(dá)從而影響細(xì)胞增殖凋亡。除此之外,TGFβRII作用可能還與Ras信號(hào)通路有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn),Ras信號(hào)通路可能介導(dǎo)TGFβRI...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中英文對(duì)照縮略詞表
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一章 不同分期EML4-ALK融合基因陽性NSCLC患者中TGF β RⅡ表達(dá)
    1、實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 .研究對(duì)象
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與耗材
    2、實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 肺腺癌石蠟組織樣本免疫組織化學(xué)檢測(cè)
        2.2 肺腺癌石蠟組織樣本實(shí)時(shí)熒光定量PCR(QPCR)檢測(cè)ALKMRNA表達(dá)
            2.2.1 引物設(shè)計(jì)與合成
            2.2.2 RNA提取
            2.2.3 反轉(zhuǎn)錄
            2.2.4 定時(shí)定量PCR
        2.3 肺腺癌石蠟組織樣本逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)檢測(cè)TGFβRIImRNA表達(dá)
            2.3.1 石蠟組織樣本總RNA提取
            2.3.2 引物設(shè)計(jì)與合成
            2.3.3 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
            2.3.4 RT-PCR反應(yīng)
    3、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1 患者基本情況
        4.2 RT-qPCR檢測(cè)EML4-ALK結(jié)果
        4.3 EML4-ALK 融合蛋白表達(dá)結(jié)果
        4.4 TGFβRIImRNA在不同分期ALK陽性NSCLC患者中表達(dá)
            4.4.1 IA期和IIIA期EML4-ALK陽性肺腺癌患者臨床病理特征
            4.4.2 IA期和IIIA期EML4-ALK陽性肺腺癌臨床石蠟組織樣本中TGFβRIImRNA表達(dá)
    5、討論
第二章 TGFΒRⅡ?qū)Ψ蜗侔〩3122細(xì)胞侵襲行為的影響
    1、實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 .研究對(duì)象
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與耗材
    2、實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 DNA膠回收
        2.2 質(zhì)粒提取
        2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.4 細(xì)胞基因組DNA提取
        2.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        2.6 載體構(gòu)建
            2.6.1 TGFβRⅡ干擾載體構(gòu)建
        2.7 慢病毒包裝
            2.7.1 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
            2.7.2 慢病毒感染及穩(wěn)定株篩選
        2.8 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
        2.9 Transwell細(xì)胞侵襲
        2.10 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        2.11 克唑替尼藥物抑制實(shí)驗(yàn)
    3、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1 TGFβRⅡshRNA轉(zhuǎn)染效率
        4.2 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.5 克唑替尼藥物抑制實(shí)驗(yàn)
    5、討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    1.EML4-ALK陽性NSCLC研究進(jìn)展
        1.1 EML4-ALK基因融合在NSCLC疾病中的臨床現(xiàn)狀
        1.2 EML4-ALK陽性NSCLC患者治療進(jìn)展
    2.TGFβ在EML4-ALK基因融合型NSCLC患者中的研究進(jìn)展
        2.1 TGFβ在NSCLC患者中的診斷研究
        2.2 IGF-β在NSCLC患者治療過程中獲得性耐藥的作用
        2.3 TGFβ在EML4-ALK陽性NSCLC患者中抗耐藥性研究
    參考文獻(xiàn)
攻讀期間的研究成果
致謝



本文編號(hào)：3855108