目的:我們前期研究表明,鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性絲氨酸蛋白激酶(calcium/calmod ulin-dependent serine protein kinase,CASK)在胰島β細(xì)胞中高表達(dá)且參與了胰島素分泌釋放過(guò)程,但其具體作用機(jī)制及在2型糖尿病中的作用尚不清楚。為在動(dòng)物水平上驗(yàn)證前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果和深入研究CASK的作用,本研究通過(guò)構(gòu)建條件性胰島β細(xì)胞CASK基因敲除(βCASK KO)小鼠動(dòng)物模型,對(duì)CASK在胰島β細(xì)胞中的功能和對(duì)糖代謝的影響進(jìn)行初步探索。方法:1.使用Cre-loxp基因打靶系統(tǒng)和他莫昔芬誘導(dǎo)構(gòu)建條件性β細(xì)胞CASK基因敲除小鼠;2.對(duì)正常飲食βCASK KO小鼠進(jìn)行代謝表型分析;3.建立高脂飲食誘導(dǎo)的2型糖尿病模型小鼠;4.對(duì)高脂飲食βCASK KO小鼠進(jìn)行代謝表型分析。結(jié)果:1.使用Cre-loxp基因打靶系統(tǒng)和他莫昔芬誘導(dǎo)后,qPCR、Western blot、免疫熒光實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)條件性胰島β細(xì)胞CASK基因敲除小鼠構(gòu)建成功;2.正常飲食喂養(yǎng)至第16周,βCASK KO小鼠與對(duì)照組小鼠相比,體重、血糖、糖耐量、胰島素敏感性、血清胰島素水平、GSIS功能以及胰...

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
主要縮略詞表
前言
文獻(xiàn)綜述
材料與方法
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 主要儀器
        1.2 主要試劑
        1.3 其他
    2.研究方法
        2.1 小鼠胰島分離提取和培養(yǎng)
        2.2 蛋白質(zhì)免疫印跡(Western blot)實(shí)驗(yàn)
        2.3 胰島 RNA 提取和定量 PCR 實(shí)驗(yàn)
        2.4 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
    3.數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)
結(jié)果
    1.條件性胰島β細(xì)胞CASK基因敲除(βCASK KO)小鼠的構(gòu)建
    2.正常飲食βCASK KO 小鼠的代謝表型分析
    3.高脂飲食 2 型糖尿病小鼠模型的建立及鑒定
    4.高脂飲食的βCASK KO 小鼠的代謝表型分析
分析與討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3814584