【目的】我國胰腺癌發(fā)病率約為6.22/10萬,是十大惡性腫瘤之一,生存率位居60種常見腫瘤之末,至今胰腺癌發(fā)生的具體機(jī)制尚未明確。胰腺癌患者存在胰蛋白酶原基因(Protease Serine 1,PRSS1)突變,而且胰蛋白酶還可作為信號(hào)分子激活蛋白酶活化受體-2(Protease activated receptor–2,PAR2)刺激胰腺癌細(xì)胞的增殖和粘附,還可以通過降解細(xì)胞外基質(zhì)參與胰腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。本研究擬在胰腺癌患者的外周血樣本中篩查PRSS1基因變異,之后通過細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因小鼠模型探討PRSS1常見的突變形式(R116C)對(duì)胰腺癌發(fā)生、發(fā)展的影響�！痉椒ā�(1)應(yīng)用全外顯子測(cè)序技術(shù)對(duì)2個(gè)胰腺癌高危家系進(jìn)行篩查,家系內(nèi)匹配對(duì)象分別為:家系1中2例胰腺導(dǎo)管腺癌和3個(gè)健康的一級(jí)親屬;家系2中1例胰腺導(dǎo)管腺癌、1例慢性胰腺炎和2個(gè)健康一級(jí)親屬。(2)致病基因數(shù)據(jù)分析,并結(jié)合遺傳模式進(jìn)行致病基因篩選。(3)對(duì)可疑的致病基因,設(shè)計(jì)引物,在散發(fā)患者中進(jìn)行Sangar測(cè)序驗(yàn)證。(4)構(gòu)建PRSS1_R116C突變穩(wěn)轉(zhuǎn)胰腺癌細(xì)胞株(PANC-1)。(5)RNA-SEQ高通...

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
英文縮寫詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一章 胰腺癌相關(guān)突變基因的篩查與驗(yàn)證
    引言
    (一) 應(yīng)用全外顯子測(cè)序技術(shù)篩查胰腺癌可疑的基因突變
        1 材料和方法
        2 分析結(jié)果
    (二) 應(yīng)用Sangar測(cè)序法驗(yàn)證胰蛋白酶原基因突變
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
        3 討論
    參考文獻(xiàn)
第二章 突變型胰蛋白酶促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移的研究
    引言
    (一) 過表達(dá)PRSS1_R116C慢病毒載體構(gòu)建和鑒定
        1 過表達(dá)慢病毒載體構(gòu)建
        2 表達(dá)檢測(cè)
    (二) PRSS1_R116C突變對(duì)胰腺癌細(xì)胞基因表達(dá)譜的影響
        1 方法學(xué)
        2 結(jié)果
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
    (三) PRSS1_R116C突變影響胰腺癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移的驗(yàn)證
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
第三章 胰蛋白酶原基因突變誘導(dǎo)胰腺癌發(fā)生的動(dòng)物模型初探
    引言
        參考文獻(xiàn)
    (一) 胰蛋白酶原基因突變轉(zhuǎn)基因小鼠模型構(gòu)建
    (二) 在體實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證PRSS1_R116C突變促進(jìn)胰腺導(dǎo)管上皮不典型增生
        1 PRSS1_R116C基因敲入小鼠的建立
        2 模型的鑒定
        3 討論
    參考文獻(xiàn)
結(jié)論
致謝
綜述 胰蛋白酶和抗胰蛋白酶失衡造就獨(dú)特的微環(huán)境與腫瘤發(fā)生的關(guān)系
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3811832