siRNA沉默F(xiàn)GF1基因表達對肺癌A549細胞侵襲性的影響及其機制研究
發(fā)布時間:2023-04-02 08:53
目的:肺癌作為當前高發(fā)惡性腫瘤,是導(dǎo)致全球癌癥死亡病例的首要原因,其中非小細胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)占肺癌總數(shù)的75%-80%。由于早期肺癌癥狀隱匿及不典型,多數(shù)患者診斷時已處于晚期,靶向治療通過作用于特異性位點專一性殺傷腫瘤細胞,較過去放化療有效改善了患者的生存率,且副反應(yīng)較低。成纖維細胞生長因子1(fibroblast growth factor1,FGF1)是FGF家族成員之一,相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)FGF1高表達與NSCLC原發(fā)病灶大小及血管侵襲性相關(guān),且高表達FGF1患者總體生存率下降,但具體分子機制尚不清楚。本研究擬從細胞水平,研究應(yīng)用小干擾RNA(small interference RNA,si RNA)沉默F(xiàn)GF1基因表達對肺癌A549細胞侵襲性的影響及可能的分子機制。方法:1、設(shè)計并合成帶有熒光標簽的FGF1的特異性si RNA即si RNA-1,si RNA-2、si RNA-3和空載體(NC-si RNA),將細胞分為5組:si RNA-1組,si RNA-2組,si RNA-3組,NC-si RNA組,對照組,分別轉(zhuǎn)染5...
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
材料和方法
1 實驗材料
1.1 細胞株
1.2 主要試劑
1.3 主要儀器
2 實驗方法
2.1 細胞培養(yǎng)
2.2 細胞轉(zhuǎn)染
2.3 Westernblot
2.4 實時熒光定量PCR
2.5 流式細胞術(shù)檢測線粒體膜電位變化
2.6 Transwell實驗檢測細胞侵襲性變化
3 統(tǒng)計學分析
結(jié)果
1 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)GF1蛋白表達水平的影響
2 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)MP-9的蛋白表達水平的影響
3 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)-cadherin的蛋白表達水平的影響
4 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)-cadherin的蛋白表達水平的影響
5 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)MP-9的mRNA表達水平的影響
6 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)-cadherin的mRNA表達水平的影響
7 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)-cadherin的mRNA表達水平的影響
8 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)粒體膜電位的影響
9 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)η忠u性的影響
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
綜述參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
縮略詞表
致謝
本文編號:3778933
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
材料和方法
1 實驗材料
1.1 細胞株
1.2 主要試劑
1.3 主要儀器
2 實驗方法
2.1 細胞培養(yǎng)
2.2 細胞轉(zhuǎn)染
2.3 Westernblot
2.4 實時熒光定量PCR
2.5 流式細胞術(shù)檢測線粒體膜電位變化
2.6 Transwell實驗檢測細胞侵襲性變化
3 統(tǒng)計學分析
結(jié)果
1 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)GF1蛋白表達水平的影響
2 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)MP-9的蛋白表達水平的影響
3 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)-cadherin的蛋白表達水平的影響
4 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)-cadherin的蛋白表達水平的影響
5 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)MP-9的mRNA表達水平的影響
6 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)-cadherin的mRNA表達水平的影響
7 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)-cadherin的mRNA表達水平的影響
8 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)粒體膜電位的影響
9 siRNA-1沉默A549細胞FGF1基因?qū)η忠u性的影響
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
綜述參考文獻
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