發(fā)布時間：2023-04-02 08:52

　　黃色條紋蛋白(Yellow stripe-like protein,YSL)功能重要且廣泛。紫花苜蓿YSL蛋白研究報道較少,作用機制尚不明確。紫花苜蓿再生體系的建立也不夠完善。本研究以轉(zhuǎn)MsYSL6和MsYSL7煙草為材料,進行后代篩選、亞顯微結構觀察、光合參數(shù)測定實驗;分析了轉(zhuǎn)基因煙草對非生物脅迫,金屬脅迫的響應;研究了2,4-D與6-BA對肇東苜蓿愈傷組織形成的影響,主要研究結果如下:1.轉(zhuǎn)MsYSL6和MsYSL7煙草后代篩選及性狀分析利用卡那培養(yǎng)基對轉(zhuǎn)MsYSL6和MsYSL7煙草種子逐代篩選,得到了T2、T3代抗性苗;對抗性苗進行PCR鑒定,獲到7個MsYSL6 T2株系和7個MsYSL7 T3株系。與WT相比,MsYSL6和MsYSL7基因的轉(zhuǎn)入導致煙草葉綠體中類囊體數(shù)目增多、淀粉粒增多;葉綠體含量增加;光合參數(shù)增加。MsYSL6和Ms YSL7基因?qū)胩岣吡宿D(zhuǎn)基因煙草的光合作用能力。2.轉(zhuǎn)MsYSL6煙草對非生物脅迫的響應鹽、堿脅迫下,轉(zhuǎn)MsYSL6煙草葉片黃化程度低于WT;干旱脅迫下,轉(zhuǎn)MsYSL6煙草的種子萌發(fā)率、幼苗根長低于WT。MsYSL6基因?qū)胩岣吡藷煵輰}、...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 植物YSL基因家族
        1.1.1 YSL基因家族的發(fā)現(xiàn)
        1.1.2 YSL基因家族的結構
        1.1.3 YSL蛋白的功能
    1.2 紫花苜蓿
        1.2.1 紫花苜蓿的經(jīng)濟價值
        1.2.2 紫花苜蓿的轉(zhuǎn)基因技術
        1.2.3 紫花苜蓿轉(zhuǎn)運蛋白的研究進展
        1.2.4 紫花苜蓿金屬營養(yǎng)的研究進展
    1.3 本課題的研究目的和意義
    1.4 技術路線
第2章 轉(zhuǎn)Ms YSL6、Ms YSL7 煙草后代篩選及分析
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 植物材料
        2.2.2 主要儀器設備
        2.2.3 主要試劑
    2.3 實驗方法
        2.3.1 轉(zhuǎn)基因煙草種子篩選
        2.3.2 轉(zhuǎn)基因煙草植株PCR鑒定
        2.3.3 亞顯微結構觀察
        2.3.4 葉綠素含量測定
        2.3.5 光合參數(shù)測定
    2.4 結果
        2.4.1 篩選獲得轉(zhuǎn)基因煙草植株
        2.4.2 PCR檢測結果
        2.4.3 轉(zhuǎn)基因煙草的亞顯微結構
        2.4.4 轉(zhuǎn)基因煙草葉綠素含量及光合參數(shù)分析
    2.5 討論
    2.6 本章小結
第3章 轉(zhuǎn)MsYSL6煙草對非生物脅迫的響應
    3.1 引言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 植物材料
        3.2.2 主要儀器設備
        3.2.3 主要試劑
    3.3 實驗方法
        3.3.1 鹽堿脅迫處理煙草葉片
        3.3.2 干旱脅迫煙草種子
        3.3.3 煙草植株豎直培養(yǎng)
    3.4 結果
        3.4.1 轉(zhuǎn)基因煙草葉片表型試驗
        3.4.2 干旱脅迫種子萌發(fā)試驗
        3.4.3 轉(zhuǎn)基因煙草植株豎直培養(yǎng)
    3.5 討論
    3.6 本章小結
第4章 轉(zhuǎn)Ms YSL6、Ms YSL7 煙草對金屬脅迫的響應
    4.1 引言
    4.2 實驗材料
        4.2.1 植物材料
        4.2.2 主要儀器設備
        4.2.3 主要試劑
    4.3 實驗方法
        4.3.1 銅脅迫處理轉(zhuǎn)基因煙草
        4.3.2 鎘脅迫處理轉(zhuǎn)基因煙草
        4.3.3 葉綠素含量測定
        4.3.4 組織化學染色
    4.4 結果
        4.4.1 銅脅迫分析
        4.4.2 鎘脅迫分析
    4.5 討論
    4.6 本章小結
第5章 肇東苜蓿組織培養(yǎng)體系的建立
    5.1 引言
    5.2 實驗材料
        5.2.1 植物材料
        5.2.2 主要儀器設備
        5.2.3 主要試劑
    5.3 實驗方法
        5.3.1 無菌苗的培養(yǎng)
        5.3.2 外植體的獲得
        5.3.3 愈傷組織的誘導
        5.3.4 不定芽的分化
        5.3.5 生根培養(yǎng)
        5.3.6 數(shù)據(jù)分析
    5.4 結果
        5.4.1 不同處理對肇東苜蓿愈傷組織誘導的影響
        5.4.2 肇東苜蓿愈傷組織的分化
        5.4.3 生根
    5.5 討論
    5.6 本章小結
結論
參考文獻
致謝



本文編號：3778932