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食蚊魚(yú)P-糖蛋白基因克隆及三氯生對(duì)其mRNA表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2023-01-09 11:41
  三氯生(TCS)是一種廣譜高效抗菌劑,在水環(huán)境和生物體內(nèi)均不同程度檢出,對(duì)水生生物具有潛在風(fēng)險(xiǎn)。P-糖蛋白(Pgp)是生物體多型異源物質(zhì)抗性防御系統(tǒng)中重要的"膜解毒蛋白",對(duì)水生生物體內(nèi)的有毒物質(zhì)和代謝產(chǎn)物具有重要的外排和轉(zhuǎn)運(yùn)作用。為探究P-gp在魚(yú)類免疫中的作用,克隆了食蚊魚(yú)(Gambusia affinis) P-gp基因的c DNA,檢測(cè)了不同濃度(50、100和150μg·L-1) TCS暴露12 h、1 d、3 d、5 d、7 d和9 d后,P-gpmRNA相對(duì)表達(dá)量的變化。實(shí)驗(yàn)獲得的食蚊魚(yú)P-gpcDNA共5 452bp,編碼1 294個(gè)氨基酸,具有ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族典型的跨膜結(jié)構(gòu)、功能區(qū)域和作用位點(diǎn),與其他鳉形目的魚(yú)類P-gp氨基酸序列同源性較高。TCS對(duì)P-gpmRNA表達(dá)的影響呈現(xiàn)倒"U"型的時(shí)間-劑量效應(yīng),50μg·L-1和100μg·L-1TCS脅迫后P-gp表達(dá)量先升高后下降,100μg·L-1暴露組表達(dá)高峰在暴露1 d時(shí),50μg·L-1TCS暴露組表... 

【文章頁(yè)數(shù)】:10 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法(Materials and methods)
    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 TCS暴露實(shí)驗(yàn)
    1.3 P-gp基因c DNA的克隆與序列分析
        1.3.1 總RNA提取及c DNA的合成
        1.3.2 c DNA克隆及測(cè)序
        1.3.3 序列分析
    1.4 TCS暴露后P-gp基因mRNA表達(dá)量的測(cè)定
2 結(jié)果(Results)
    2.1 食蚊魚(yú)P-gp基因序列擴(kuò)增與分析
    2.2 食蚊魚(yú)P-gp氨基酸序列的同源性分析
    2.3 TCS暴露對(duì)食蚊魚(yú)P-gp基因mRNA表達(dá)的影響
3 討論(Discussion)
    3.1 食蚊魚(yú)P-gp基因序列分析
    3.2 TCS對(duì)P-gp基因mRNA表達(dá)的影響


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]P糖蛋白及其在水生生物多型異源物質(zhì)抗性中的研究進(jìn)展[J]. 高春蕾,趙翠瓊,姜美潔,賈智慧,王宗靈.  海洋湖沼通報(bào). 2016(04)
[2]雌二醇、雙酚A和苯并[a]芘對(duì)食蚊魚(yú)目標(biāo)基因表達(dá)的影響[J]. 熊甜甜,方展強(qiáng).  生物學(xué)雜志. 2015(05)
[3]食蚊魚(yú)(Gambusia afinis)cat、gapdh和gst基因的克隆及其在生態(tài)毒理學(xué)中的應(yīng)用[J]. 歐瑞康,武小燕,庫(kù)培佳,王蘭,蘇甜,梁惜梅,聶湘平.  生態(tài)毒理學(xué)報(bào). 2015(03)
[4]劍尾魚(yú)P-糖蛋白基因全長(zhǎng)cDNA克隆、分析及組織分布[J]. 王芳,李凱彬,聶湘平,劉春,勞海華,王英英,梁慧麗,吳淑勤.  水生生物學(xué)報(bào). 2013(05)
[5]基于P-糖蛋白基因表達(dá)評(píng)價(jià)尼羅羅非魚(yú)體內(nèi)恩諾沙星代謝“首過(guò)效應(yīng)”[J]. 胡鯤,程鋼,呂利群,章海鑫,王會(huì)聰,阮記明,陳力,房文紅,楊先樂(lè).  中國(guó)水產(chǎn)科學(xué). 2013(02)
[6]DDT、苯并[a]芘暴露對(duì)阿部鯔蝦虎魚(yú)P糖蛋白mRNA表達(dá)的影響[J]. 劉春,李凱彬,王慶,王芳,常藕琴,梁慧麗,吳淑勤.  生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào). 2012(10)
[7]海膽胚胎不同發(fā)育期P-糖蛋白(P-glycoprotein)藥物外排功能的研究[J]. 孫雪峰,丁君,黃洪輝,王媛,王永華.  生態(tài)毒理學(xué)報(bào). 2009(03)



本文編號(hào):3729123

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