煙草查爾酮異構(gòu)酶（Chalcone isomerase,CHI）是黃酮類代謝的一個(gè)關(guān)鍵酶,煙草中有兩個(gè)基因拷貝（NtCHI1、NtCHI2）,相關(guān)研究多集中在NtCHI1基因,對(duì)NtCHI2的研究較少。為研究煙草NtCHI2的功能,主要以NtCHI2的過表達(dá)和干擾植株葉片為材料,進(jìn)行了實(shí)時(shí)定量PCR和CHI活性分析以及蕓香苷含量檢測(cè),同時(shí)進(jìn)行了NtCHI2體外表達(dá)蛋白的酶活分析。結(jié)果表明:NtCHI2體外表達(dá)蛋白具有查爾酮異構(gòu)酶活性;過表達(dá)株系中NtCHI2的表達(dá)量升高5～75倍,但CHI酶活性和蕓香苷含量基本沒有變化;干擾株系中NtCHI2的表達(dá)量降至70%,CHI酶活性和蕓香苷含量分別降低50%和90%。煙草NtCHI2參與蕓香苷的合成代謝調(diào)控,在一定程度上NtCHI2基因的表達(dá)量和蕓香苷的含量正相關(guān)。 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料、試劑和儀器
        1.1.1 煙草材料
        1.1.2 試劑
        1.1.3 儀器
    1.2 方法
        1.2.1 煙草葉片RNA提取及c DNA制備
        1.2.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q PCR)
        1.2.3 煙草葉片總蛋白提取及定量
            1.2.3. 1 蛋白提取
            1.2.3. 2 蛋白定量
        1.2.4 查爾酮異構(gòu)酶活性檢測(cè)
        1.2.5 查爾酮異構(gòu)酶體外表達(dá)活性檢測(cè)
        1.2.6 蕓香苷含量檢測(cè)
2 結(jié)果與分析
    2.1 查爾酮異構(gòu)酶基因過表達(dá)株系和干擾株系中Nt CHI2的表達(dá)量
    2.2 查爾酮異構(gòu)酶基因過表達(dá)株系和干擾株系中CHI的活性
    2.3 體外表達(dá)查爾酮異構(gòu)酶的活性
    2.4 查爾酮異構(gòu)酶基因過表達(dá)株系和干擾株系中蕓香苷含量
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]煙草類黃酮合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的篩選及功能分析[D]. 王姍姍.中國煙草總公司鄭州煙草研究院 2018



本文編號(hào)：3701344