露地菊是北方重要的園林綠化花卉之一,具有管理粗放、植株矮小、花色繁多等特點(diǎn)。質(zhì)膜內(nèi)在蛋白（Plasma membrane intrinsic proteins,PIPs）作為水孔蛋白超家族MIP家族的一員,能夠調(diào)節(jié)植物細(xì)胞間水分平衡,參與滲透脅迫應(yīng)答,調(diào)節(jié)氣孔運(yùn)動(dòng),在植物抗逆境脅迫中起到重要的作用。為研究露地菊CmPIP1和CmPIP2基因功能,選取了東北林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院花卉生物工程研究所選育的五種露地菊:’粉紗裙’、’金秋’、’紫濤’、’火焰’、’粉佳人’,在不同NaCl濃度培養(yǎng)下,探尋不同植株的抗鹽能力,及葉片中Na+、K+的含量和CmPIP1/2基因相對(duì)表達(dá)量的關(guān)系。同時(shí)研究CmPIP1和CmPIP2在露地菊’火焰’中的表達(dá)特性。利用實(shí)驗(yàn)室已構(gòu)建的CmPIP1和CmPIP2的過(guò)表達(dá)和干涉載體,通過(guò)農(nóng)桿菌侵染的方法,獲得CmPIP1和CmPIP2的過(guò)表達(dá)和干涉露地菊’火焰’轉(zhuǎn)基因植株,并對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行抗鹽性驗(yàn)證,為培育出抗鹽能力更強(qiáng)的露地菊新品系提供有力的分子基礎(chǔ),豐富鹽堿地區(qū)花卉種植品種。本研究的主要結(jié)果如下:1.露地菊’粉紗裙’、’金秋’、’紫濤’、’火焰’、’粉佳人’分... 

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 露地菊研究概況
    1.2 PIP基因的研究進(jìn)展
    1.3 植物抗性研究
    1.4 本研究的目的和意義
2 五種露地菊抗鹽性比較及與CmPIP表達(dá)量的相關(guān)性分析
    2.1 材料與試劑
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 試驗(yàn)試劑
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 五種露地菊Na+和K+含量的測(cè)定
        2.2.2 五種露地菊中CmPIP1和CmPIP2基因相對(duì)表達(dá)量分析
            2.2.2.1 露地菊葉片總RNA的提取
            2.2.2.2 Real-Time PCR反應(yīng)測(cè)定CmPIP1和CmPIP2的相對(duì)表達(dá)量
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 五種露地菊Na~+和K~+含量的測(cè)定
        2.3.2 五種露地菊K~+/Na~+含量比值與CmPIP表達(dá)量的相關(guān)性
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
3 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因表達(dá)特性分析
    3.1 材料與試劑
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因生物節(jié)律
        3.2.2 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因組織特異性
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因生物節(jié)律
        3.3.2 露地菊CmPIP1和CmPIP2基因組織特異性
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
4 CmPIP遺傳轉(zhuǎn)化露地菊及抗鹽性驗(yàn)證
    4.1 材料與試劑
        4.1.1 試驗(yàn)材料
        4.1.2 試驗(yàn)試劑
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 CmPIP1和CmPIP2遺傳轉(zhuǎn)化露地菊
        4.2.2 轉(zhuǎn)基因植株的鑒定
        4.2.3 MDA含量測(cè)定
        4.2.4 轉(zhuǎn)基因植株表型鑒定
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 CmPIP1和CmPIP2遺傳轉(zhuǎn)化露地菊
        4.3.2 轉(zhuǎn)基因植株的鑒定
        4.3.3 鹽脅迫下轉(zhuǎn)基因植株MDA含量測(cè)定
        4.3.4 轉(zhuǎn)基因植株表型鑒定
    4.4 討論
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]非生物逆境對(duì)植物水孔蛋白表達(dá)調(diào)控的研究進(jìn)展[J]. 王文鋮,崔克輝.  植物生理學(xué)報(bào). 2016(04)
[2]植物抗旱耐鹽機(jī)理的研究進(jìn)展[J]. 胡興旺,金杭霞,朱丹華.  中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2015(24)
[3]植物耐鹽堿基因工程研究進(jìn)展[J]. 郭文芳,農(nóng)萬(wàn)廷,李剛強(qiáng),劉德虎.  生物技術(shù)通報(bào). 2015(07)
[4]植物耐寒生理及蛋白質(zhì)組學(xué)研究進(jìn)展[J]. 安飛飛,李庚虎,陳霆,林立銘,歐文軍.  中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2015(14)
[5]逆境條件下水孔蛋白PIPs作用的研究進(jìn)展[J]. 孫天旭,李玉花,張旸.  植物生理學(xué)報(bào). 2014(06)
[6]胡楊谷胱甘肽過(guò)氧化物酶PeGPX基因的克隆及轉(zhuǎn)化植株耐鹽性分析[J]. 王菲菲,丁明全,鄧澍榮,王美娟,孫健,侯佩臣,馬旭君,張玉紅,趙楠,沈昕,陳少良.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2012(03)
[7]Proteomic analysis of seed germination under salt stress in soybeans[J]. Xiao-yan XU1,2, Rui FAN1, Rui ZHENG1,3, Chun-mei LI1, De-yue YU 1 (1National Center for Soybean Improvement, National Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China) (2Foundation Department, Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry, Jurong 212400, China) (3College of Life Sciences, Ningxia University, Yinchuan 750021, China).  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine ＆ Biotechnology）. 2011(07)
[8]植物水孔蛋白最新研究進(jìn)展[J]. 李紅梅,萬(wàn)小榮,何生根.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2010(01)
[9]菊花種質(zhì)資源研究進(jìn)展[J]. 張莉俊,戴思蘭.  植物學(xué)報(bào). 2009(05)
[10]德抗961小麥耐鹽生理特性研究[J]. 梁超,王超,楊秀風(fēng),張秀田,王瑋.  西北植物學(xué)報(bào). 2006(10)

博士論文
[1]花特異嵌合啟動(dòng)子功能分析及百合ACO RNAi遺傳轉(zhuǎn)化[D]. 杜靈娟.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013

碩士論文
[1]過(guò)表達(dá)AtTIP和AtNHX基因?qū)M南芥耐鹽性的影響[D]. 劉倩.曲阜師范大學(xué) 2016
[2]野生毛葡萄質(zhì)膜水通道蛋白基因的克隆與功能驗(yàn)證[D]. 顏培玲.貴州大學(xué) 2015
[3]露地菊品種‘紫秋裳’再生及遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立[D]. 高曉霞.東北林業(yè)大學(xué) 2014
[4]根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)PCFH基因轉(zhuǎn)化菊花的研究[D]. 王歡.北京林業(yè)大學(xué) 2007
[5]利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將類胡蘿卜素合成酶基因LycB導(dǎo)入番茄、菊花的研究[D]. 任永霞.中國(guó)人民解放軍軍需大學(xué) 2003



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