EIN3基因是乙烯信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中重要的轉(zhuǎn)錄因子,在植物的衰老中發(fā)揮重要的作用。為研究EIN3基因在白樺中的表達(dá)特性,通過PCR方法克隆了2 843 bp白樺BpEIN3基因的啟動(dòng)子區(qū)域片段,構(gòu)建了pBpEIN3::CUS表達(dá)載體進(jìn)行白樺轉(zhuǎn)基因,獲得1株pBpEIN3::CUS白樺株系;并利用PLANCE在線軟件對(duì)BpEIN3基因啟動(dòng)子片段的主要順式作用元件進(jìn)行的分析預(yù)測(cè);同時(shí)分別用ET、IAA、MeJA、SA和GA處理轉(zhuǎn)pBpEIN3::GUS白樺株系,通過實(shí)時(shí)定量PCR及GUS活性的檢測(cè)分析該啟動(dòng)子的表達(dá)調(diào)控模式。結(jié)果表明,BpEIN3啟動(dòng)子包含著多種功能的調(diào)控順式元件;且pBpEIN3::GUS對(duì)不同激素均有不同程度的響應(yīng),其中SA、GA響應(yīng)最為明顯,說明不同激素對(duì)BpEIN3基因的表達(dá)模式產(chǎn)生了影響。綜上表明:所克隆的BpEIN3基因上游2 843 bp的DNA片段具有啟動(dòng)子活性,且能驅(qū)動(dòng)報(bào)告基因的有效表達(dá),為后續(xù)基因功能的研究奠定基礎(chǔ)。 

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 植物材料
    1.2 主要試劑與載體
    1.3 BpEIN3啟動(dòng)子序列分析及克隆
    1.4 植物表達(dá)載體構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化
    1.5 pBpEIN3::GUS的白樺分子檢測(cè)
    1.6 pBpEIN3::GUS轉(zhuǎn)基因白樺不同激素處理下GUS基因的相對(duì)表達(dá)
    1.7 不同激素處理下pBpEIN3::GUS株系GUS活性測(cè)定
2 結(jié)果與分析
    2.1 BpEIN3啟動(dòng)子序列分析
    2.2 BpEIN3啟動(dòng)子克隆及pBpEIN3::GUS重組載體的獲得
    2.3 轉(zhuǎn)pBpEIN3::GUS白樺株系的獲得
    2.4 不同激素處理后pEIN3::GUS株系GUS表達(dá)量分析
    2.5 不同激素處理后pEIN3::GUS株系GUS活性分析
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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