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降鈣素基因相關(guān)肽抑制銅綠假單胞菌外膜囊泡致炎作用

發(fā)布時間:2022-05-02 23:41
  目的探討降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)對銅綠假單胞菌外膜囊泡(OMVs)誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的影響。方法培養(yǎng)銅綠假單胞菌并提取OMVs,取1、5、10μg·mL-1 OMVs刺激鼠巨噬細胞RAW264.7,采用ELISA法檢測細胞中促炎性細胞因子[包括白細胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)]含量,采用CCK-8法及流式細胞術(shù)分別檢測細胞增殖及凋亡;采用10μg·mL-1 OMVs與1、5、10 nmol·L-1 CGRP同時處理RAW264.7細胞,并檢測細胞中促炎細胞因子水平;采用20μg·mL-1 OMVs與10 nmol·L-1 CGRP同時處理RAW264.7細胞,檢測細胞增殖與凋亡;培養(yǎng)人中性粒細胞,采用脫顆粒實驗檢測CGRP對其分泌中性粒細胞明膠酶脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)及彈性蛋白酶活性的影響。結(jié)果不同濃度OMVs均能顯著刺激RAW264.7細胞分泌TNF-α、IL-6和IL-1β(P<0.05),而CGRP則能夠抑制RAW264.7細... 

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
    1.2 銅綠假單胞菌培養(yǎng)與OMVs收集
    1.3 RAW264.7細胞培養(yǎng)與處理
    1.4 ELISA檢測
    1.5 CCK-8檢測
    1.6 流式細胞術(shù)
    1.7 中性粒細胞脫顆粒試驗
    1.8 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 OMVs誘導(dǎo)RAW264.7細胞分泌促炎細胞因子
    2.2 CGRP下調(diào)OMVs誘導(dǎo)RAW264.7細胞分泌促炎細胞因子
    2.3 CGRP抑制OMVs所致細胞毒性與凋亡
    2.4 CGRP抑制中性粒細胞脫顆粒
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本文編號:3650189

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