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GSDMD基因敲除對內(nèi)毒素所致小鼠急性肺損傷的保護(hù)作用

發(fā)布時(shí)間:2022-04-28 22:20
  目的探討GSDMD基因?qū)?nèi)毒素所致小鼠急性肺損傷(ALI)的作用。方法 20只野生型C57BL/6小鼠和20只GSDMD基因敲除C57BL/6小鼠隨機(jī)分為野生型對照組(WT-sham組)、野生型ALI組(WT-ALI組)、基因敲除型對照組(KO-sham組)及基因敲除型ALI組(KO-ALI組),每組10只。ALI組經(jīng)氣管滴入1 mg/kg脂多糖(LPS)制備小鼠ALI模型,對照組氣管滴入等體積的PBS溶液。造模成功后取肺組織和肺泡灌洗液(BALF)。肺組織行HE染色,光鏡下完成肺損傷半定量評分,并測量肺組織濕/干重比(W/D);采用BCA法檢測BALF中總蛋白含量,ELISA法檢測BALF中TNF-α、IL-1β和IL-6水平;Western blotting檢測BALF和肺組織中焦亡相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果與WT-ALI組相比,KO-ALI組小鼠肺損傷半定量評分及肺組織W/D均明顯降低(P<0.01),BALF中總蛋白含量以及TNF-α、IL-1β、IL-6水平亦明顯降低(P<0.05或P<0.01)。基因敲除型小鼠未見GSDMD蛋白的表達(dá)和活化。野生型小鼠和基因敲除... 

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 主要試劑及儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)動物及分組
    1.3 小鼠ALI模型制備
    1.4 標(biāo)本采集
        1.4.1 肺組織病理學(xué)觀察及肺損傷嚴(yán)重程度評價(jià)
        1.4.2 收集BALF
            1.4.2.1 ELISA法測定BALF中TNF-α、IL-6及IL-1β水平
            1.4.2.2 BCA法測定BALF中總蛋白含量
        1.4.3 測量肺組織W/D
    1.5 Western blotting檢測焦亡相關(guān)蛋白表達(dá)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié) 果
    2.1 各組小鼠肺組織病理學(xué)檢測及肺損傷半定量評分結(jié)果比較
    2.2 各組小鼠肺組織W/D比較
    2.3 各組小鼠BALF中總蛋白含量比較
    2.4 各組小鼠BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平比較
    2.5 各組小鼠BALF及肺組織中焦亡相關(guān)蛋白的表達(dá)
3 討 論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Gasdermin D蛋白對內(nèi)毒素導(dǎo)致肺泡巨噬細(xì)胞焦亡的影響[J]. 帥維正,李軍,陳旭昕,李大偉,張志成.  中華肺部疾病雜志(電子版). 2020(04)
[2]NLRP3炎性小體——急性肺損傷的發(fā)病核心[J]. 羅亞嵐,許才明,李兆霞,蔣柳,陳海龍.  中國急救醫(yī)學(xué). 2019 (03)
[3]不同機(jī)械通氣潮氣量對肺損傷影響研究[J]. 白楊,劉尚典.  創(chuàng)傷與急危重病醫(yī)學(xué). 2018(06)
[4]烏司他丁在脂多糖/尼日利亞菌素誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞焦亡中的作用[J]. 周俊杰,吳實(shí)正,段鵬凱,袁媛,何璇,童華生.  解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2018(07)
[5]不同無創(chuàng)通氣模式治療急性心源性肺水腫臨床療效觀察[J]. 李力,王朝暉,殷明偉.  創(chuàng)傷與急危重病醫(yī)學(xué). 2018(03)
[6]LPS直接及間接作用致小鼠急性肺損傷模型的建立[J]. 陳英華,呂嘉文,翟啟良,謝哲凡,胡國棟.  中國臨床解剖學(xué)雜志. 2015(04)
[7]氣管滴注法與霧化吸入法建立小鼠急性肺損傷模型及其效果比較[J]. 苑少欣,孔雅嫻,李蕊,劉三海,朱安妮,喬艷雪,張劍平.  中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志(電子版). 2014(02)



本文編號:3649648

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