試驗旨在克隆山羊CMKLR1基因序列并進行生物信息學分析,研究其表達與肌內(nèi)脂肪（IMF）沉積的相關性。采集山羊皮下脂肪組織,應用RT-PCR克隆山羊CMKLR1基因序列;以GAPDH（GenBank登錄號:AJ431207.1）為內(nèi)參基因,實時熒光定量PCR檢測其在山羊不同組織中的表達量及在肌肉組織中的時序表達譜（以肝臟表達量為基準）;測定肌肉組織中的IMF含量,分析其與CMKLR1mRNA表達量的相關性。結果顯示,克隆獲得了山羊CMKLR1基因,1 089bp的CDS區(qū),GenBank登錄號:KT165374。實時熒光定量PCR分析顯示,CMKLR1基因在24月齡山羊心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、脂肪、背最長肌、股二頭肌和臂三頭肌中均存在不同程度的表達,其中在肺臟中表達量顯著高于其他組織（P<0.05）;CMKLR1基因在1~3和24月齡的山羊背最長肌、臂三頭肌和股二頭肌中表達趨勢相同,均是在股二頭肌中表達量最高,而8~10月齡則是在臂三頭肌中表達量最高。山羊IMF含量以24月齡背最長肌含量最高。山羊背最長肌、股二頭肌和臂三頭肌中CMKLR1mRNA表達與IMF含量相關性不顯著... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗動物與樣品采集
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 RNA提取及cDNA合成
    1.4 引物設計與合成
    1.5 山羊CMKLR1基因的克隆
    1.6 山羊CMKLR1基因及其編碼蛋白的生物信息學分析
    1.7 組織表達譜
    1.8 IMF含量測定
    1.9 統(tǒng)計分析
2 結果
    2.1 山羊CMKLR1基因克隆
    2.2 山羊CMKLR1生物信息學分析
    2.3 山羊CMKLR1及其編碼蛋白與其他物種的同源性比對
    2.4 組織差異分析
    2.5 時序表達分析
    2.6 山羊CMKLR1mRNA表達量與IMF含量的相關性分析
3 討論
    3.1 山羊CMKLR1mRNA的組織表達規(guī)律
    3.2 山羊CMKLR1 mRNA在肌肉組織中的時序表達及與IMF沉積的關系
4 結論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]豬脂肪沉積候選基因AOC3、PPARG1及SOD3 DNA甲基化差異研究[J]. 張?zhí)?張龍超,王立剛,王立賢.  中國畜牧獸醫(yī). 2016(11)
[2]藏雞Chemerin和ChemR23基因時序表達及其與肌內(nèi)脂肪含量的相關性研究[J]. 林亞秋,徐亞歐,張潤鋒,張明,左斌,鄭玉才.  畜牧獸醫(yī)學報. 2015(08)
[3]簡州大耳羊繁殖性能選育研究及遺傳進展分析[J]. 范景勝,熊朝瑞,俄木曲者,王永,張紅平,鄭水明.  畜牧與獸醫(yī). 2014(12)
[4]豬Chemerin和受體基因的克隆與組織分布[J]. 王靜,李宏基,韓立強,王偉杰,武寧曉,張志強,臺玉磊,臧猛,楊國宇.  江西農(nóng)業(yè)大學學報. 2009(03)

碩士論文
[1]秦川牛Chemerin基因及其受體CMKLR1基因組織表達譜及多態(tài)性研究[D]. 宋付標.西北農(nóng)林科技大學 2011
[2]豬chemerin，ChemR23及GPR1對脂代謝的調(diào)控研究[D]. 黃健鋒.華中農(nóng)業(yè)大學 2010



本文編號：3649493