乳酸乳球菌廣泛應(yīng)用于發(fā)酵乳制品,其中一些菌株具有產(chǎn)胞外多糖（Exopolysaccharides,EPS）的特性。乳酸菌EPS結(jié)構(gòu)多變,生物合成復(fù)雜,為了解析新的乳酸菌EPS結(jié)構(gòu)特征,探究其生物合成機(jī)制,本論文以分離自錫林郭勒盟嚼口的一株具有產(chǎn)EPS的乳酸乳球菌乳酸亞種IMAU11823為研究對(duì)象,對(duì)其產(chǎn)生的EPS進(jìn)行分離純化、初級(jí)結(jié)構(gòu)解析,完成菌株全基因組測(cè)序和菌株不同生長(zhǎng)階段eps基因簇轉(zhuǎn)錄分析等。主要研究結(jié)果如下:1.菌株IMAU11823以2%的接種量接種于M17液體培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)24 h后粗多糖得率為201.44 mg/L;該粗多糖具有較強(qiáng)的還原能力和DPPH自由基、羥基自由基清除能力,且具有濃度依賴(lài)性。利用DEAE-52陰離子交換柱對(duì)獲得的粗多糖進(jìn)行分離純化得到三個(gè)組分,分別命名為EPS-1、EPS-2 和 EPS-3。2.進(jìn)一步對(duì)EPS-1和EPS-2的結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行研究,結(jié)果表明EPS-1由甘露糖和葡萄糖組成,摩爾比為1:7.01;EPS-2由甘露糖、鼠李糖和葡萄糖組成,摩爾比為7.45:1:2.34。紅外光譜分析結(jié)果表明,兩者均具有多糖的特征吸收峰,且都含有吡喃糖苷... 

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
1 引言
    1.1 多糖概述
    1.2 乳酸菌胞外多糖概述
        1.2.1 乳酸菌
        1.2.2 乳酸菌胞外多糖
        1.2.3 胞外多糖在食品行業(yè)的應(yīng)用
        1.2.4 胞外多糖的生物活性
    1.3 胞外多糖結(jié)構(gòu)的鑒定方法
        1.3.1 胞外多糖的分離純化
        1.3.2 胞外多糖初級(jí)結(jié)構(gòu)分析方法
    1.4 乳酸菌胞外多糖生物合成及其基因簇
        1.4.1 胞外多糖的生物合成
        1.4.2 乳酸菌的eps基因簇
    1.5 乳酸乳球菌胞外多糖概述
        1.5.1 乳酸乳球菌
        1.5.2 乳酸乳球菌胞外多糖研究進(jìn)展
        1.5.3 乳酸乳球菌的eps基因簇
    1.6 立題意義與研究?jī)?nèi)容
        1.6.1 立題意義
        1.6.2 研究?jī)?nèi)容
2 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 實(shí)驗(yàn)菌株
    2.2 試劑與儀器
        2.2.1 材料與試劑
        2.2.2 儀器與設(shè)備
3 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 胞外多糖的結(jié)構(gòu)特征鑒定
        3.1.1 乳酸乳球菌乳酸亞種IMAU11823胞外多糖的制備
        3.1.2 粗多糖體外抗氧化特性的測(cè)定
        3.1.3 乳酸乳球菌乳酸亞種IMAU11823粗多糖的純化
        3.1.4 單糖組成分析
        3.1.5 紅外光譜分析
        3.1.6 核磁共振波譜
    3.2 全基因組測(cè)序及eps基因簇鑒定
        3.2.1 菌株培養(yǎng)與基因組DNA的提取
        3.2.2 全基因組測(cè)序和組裝
        3.2.3 基因組注釋
        3.2.4 基因組比較分析
        3.2.5 核酸序列登錄號(hào)
    3.3 關(guān)鍵基因的微滴式數(shù)字PCR定量分析
        3.3.1 RNA的提取
        3.3.2 cDNA的合成
        3.3.3 關(guān)鍵基因的微滴式數(shù)字PCR
4 結(jié)果與分析
    4.1 胞外多糖含量及體外抗氧化特性的測(cè)定
        4.1.1 胞外多糖含量測(cè)定結(jié)果
        4.1.2 粗多糖體外抗氧化活性
    4.2 胞外多糖結(jié)構(gòu)測(cè)定與解析
        4.2.1 胞外多糖的分離純化
        4.2.2 胞外多糖的單糖組成
        4.2.3 胞外多糖的紅外光譜分析
        4.2.4 胞外多糖的核磁共振波譜分析
    4.3 乳酸乳球菌乳酸亞種IMAU11823全基因組測(cè)序及eps基因簇鑒定
        4.3.1 乳酸乳球菌乳酸亞種IMAU11823的基因組特征
        4.3.2 乳酸乳球菌乳酸亞種IMAU11823功能注釋
        4.3.3 乳酸乳球菌乳酸亞種基因組的比較分析
        4.3.4 糖代謝相關(guān)基因的分析
        4.3.5 胞外多糖生物合成基因簇的鑒定
        4.3.6 關(guān)鍵基因表達(dá)量的分析
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]自然發(fā)酵乳制品中乳酸菌的生物多樣性[J]. 張和平.  生命科學(xué). 2015(07)
[2]1株高產(chǎn)EPS嗜熱鏈球菌的篩選及培養(yǎng)條件優(yōu)化[J]. 劉麗波,李春,孟祥晨.  中國(guó)食品學(xué)報(bào). 2007(03)

博士論文
[1]德氏乳桿菌保加利亞亞種的群體遺傳學(xué)和功能基因組學(xué)研究[D]. 宋宇琴.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018

碩士論文
[1]瑞士乳桿菌MB2-1胞外多糖制備、結(jié)構(gòu)和生理功能的研究[D]. 紀(jì)鵑.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]馬奶酒樣乳桿菌ZW3（CGMCC2809）WANG1297基因的克隆、表達(dá)與功能研究[D]. 西艷雙.天津科技大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3649300