TaEPFL1基因是表皮模式建成因子（EPFL）基因家族的成員,EPFL基因家族參與調(diào)節(jié)植物一系列生長發(fā)育過程。為了更好的了解TaEPFL1基因在小麥生長發(fā)育過程中的作用,我們以中國春小麥成熟種子為材料,采用CRISPR/Cas9技術(shù)特異性編輯該基因外顯子區(qū)域產(chǎn)生靶向敲除小麥。通過研究突變基因的作用,闡明該基因的正常功能。本研究分別探討滅菌方式、麥草畏濃度、氨基酸組分和比例、農(nóng)桿菌和成熟胚共培養(yǎng)時間、農(nóng)桿菌和愈傷組織共培養(yǎng)時間等對愈傷組織誘導(dǎo)和生長發(fā)育的影響。具體研究結(jié)果如下:1、當(dāng)75%酒精浸泡時間控制在180s,30%雙氧水滅菌時間15s以上時,或當(dāng)30%雙氧水消毒時間控制在180s,75%酒精浸泡時間15s以上時,成熟胚均未染菌。麥草畏誘導(dǎo)中國春成熟胚愈傷組織的最適濃度是2.5 mg·L^-1。甘氨酸、天冬氨酸、脯氨酸和亮氨酸是小麥成熟胚誘導(dǎo)的必須氨基酸。正交實驗表明,中國春組培的最佳氨基酸配方為甘氨酸60.0 mg·L^-1,天冬氨酸2.0 mg·L^-1,脯氨酸2.0 mg·L^-1,亮氨酸0.1... 

【文章來源】：西華師范大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

培養(yǎng)14天后的愈傷組織

高分辨率熔解曲線聚類（野生型為標(biāo)準(zhǔn)）

序列對比figure8compareofsequence

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]小麥表皮模式建成因子基因（TaEPFL1）的克隆、定位及表達(dá)分析[J]. 孫清栩,曲繼鵬,彭正松,余燕,楊軍,吳一磊,楊在君.  分子植物育種. 2018(10)
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本文編號：3522297