低溫是常見的環(huán)境脅迫因子,嚴(yán)重影響植物的生長發(fā)育。轉(zhuǎn)錄因子可以與多類在編碼非生物脅迫相關(guān)基因啟動子區(qū)域存在的順式元件相互作用,通過植物體內(nèi)信號通路調(diào)節(jié)一系列與非生物脅迫相關(guān)基因的表達(dá),從而賦予目標(biāo)植物更強(qiáng)的抗逆性。本實(shí)驗使用“神馬”菊花[Dendronthema×grandiform（Ramat.）Kitamura]CV.Jinba為實(shí)驗材料,通過分析低溫處理過的菊花與野生菊花的差異表達(dá)基因,使用生物技術(shù)手段獲得DgbZIP2和DgNF-YA1基因過表達(dá)的轉(zhuǎn)基因菊花植株,對其進(jìn)行耐寒性研究鑒定,對菊花的抗低溫脅迫育種提供一定的理論依據(jù),對菊花新品種的選育具有重要的意義。主要研究結(jié)果如下:1.分別分析了常溫和低溫脅迫下DgbZIP2基因和DgNF-YA1基因在菊花各個組織中的表達(dá)量,結(jié)果表明DgbZIP2基因和DgNF-YA1基因的表達(dá)量在低溫下被誘導(dǎo)上調(diào),且與其他組織相比較,這兩個基因在葉片中有著更高的表達(dá)水平。2.過表達(dá)DgbZIP2基因的菊花選取OE-9和OE-171株系,過表達(dá)DgNF-YA1基因的菊花選取OE-32和OE-54株系,將其和野生型菊花一起進(jìn)行低溫脅迫實(shí)驗,觀察低溫... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

A:DgbZIP2基因的PCR擴(kuò)增電泳圖；B:DgNF-YA1基因的PCR擴(kuò)增電泳圖

26圖2-2DgbZIP2基因開放閱讀框的核苷酸序列和推測的氨基酸序列Fig.2-2ThenucleotidesequenceandthededucedaminoacidsequenceoftheopenreadingframeofDgbZIP234AcbZIP1239AtbZIP5339DgbZIP237NtbZIP1420PIA37023.138XP_016710680.1Consensus..M....TAA.S.SSS.A.PPS.S.EGG.SSSSS.SSDDD.DENGG.SEDDQ.DDPL..PRRRR.QQYYY.YVAAA.AVTNT.NVVLN.I.T....DDDD.DQEED.ERRRR.RKKKK.KQRRRQRKKKKRKrRRRRRRmMMMMMMLIIEILsSSSSSSnNNNNNNrRRRRRReEEEEEEsSSSSSSaAAAAAArRRRRRRrRRRRRRsSSSSSSrRRRRRRMMAMMMRRKRRRkKKKKKKqQQQQQQQKNQQK74AcbZIP1279AtbZIP5379DgbZIP277NtbZIP1460PIA37023.178XP_016710680.1ConsensusRQRHHRlLLLLLLDGDEDQEDEEEDlLLLLLLVILMLVNNGSNQQEEQQEAVIMVVATNTANRLNQQAlLLLLLLKKQQQQNNNNQKEDDQDDnNNNNNNTANVSSQKMLGQIIIWIILTMRLSMEKE

27圖2-4菊花bZIP2與耬斗菜、棉花、煙草等植物中bZIP類基因進(jìn)化關(guān)系Figure2-4TheevolutionaryrelationshipbetweenbZIP2andbZIPgenesinplantssuchascolumbine,cotton,andtobacco.DgNF-YA1基因的cDNA堿基序列有2460bp，開放閱讀框為501bp，共計編碼了166個氨基酸殘基，蛋白質(zhì)分子量為18.88kDa，蛋白質(zhì)等電點(diǎn)為10.58。編碼區(qū)氨基酸序列如圖2-5所示。在NCBI中對DgNF-YA1的氨基酸序列進(jìn)行BLAST同源性分析（圖2-6），結(jié)果顯示，DgNF-YA1與芝麻（SesamumindicumL.）XP_011080345.1的同源性為54％，與桑樹（MorusalbaL.）ALC74585.1的同源性為51％，與茶樹（PistaciachinensisBunge）XP_028083725.1的同源性為49%，與櫻桃（Cerasuspseudocerasus(Lindl.)G.Don）PaNF-YA2的同源性為45％，與番木瓜（CaricapapayaL.）CpNF-YA6的同源性為41％。根據(jù)收集到的資料構(gòu)建了DgNF-YA1與其他NF-YA類蛋白的系統(tǒng)發(fā)育樹（圖2-7）。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3519455