目的 :研究沉默髓樣細胞白血病1（myeloid cell leukemia-1,Mcl-1）基因表達對腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體（tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL）誘導(dǎo)人胃腺癌耐多柔比星（adriamycin,ADR）SGC7901/ADR細胞凋亡的影響,并探討胃癌耐藥細胞株耐T RAI L凋亡效應(yīng)的可能機制。方法 :不同質(zhì)量濃度的TRAIL（10、50和100 ng/m L）處理SGC7901/ADR細胞后,采用MTT法和FCM法分別檢測細胞活力和細胞凋亡率,實時熒光定量PCR法和蛋白質(zhì)印跡法分別檢測SGC7901/ADR細胞中Mcl-1 m RNA和蛋白的表達水平。采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將Mcl-1-si RNA轉(zhuǎn)染至SGC7901/ADR細胞,實時熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測Mcl-1-si RNA對Mcl-1 m RNA及蛋白表達水平的影響。采用TRAIL（50 ng/m L）處理Mcl-1基因沉默后的SGC7901/ADR細胞,MTT法和FCM法分別檢測Mcl-1基因沉默后TRAIL對... 

【文章來源】：腫瘤. 2016,36(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1材料與方法
    1.1細胞和試劑
    1.2 細胞培養(yǎng)
    1.3 MTT法檢測TRAIL對SGC7901/ADR細胞活力的影響
    1.4 FCM法檢測TRAIL對SGC7901/ADR細胞凋亡的影響
    1.5 實時熒光定量PCR檢測TRAIL對SGC7901/ADR細胞中Mcl-1 m RNA表達的影響
    1.6 蛋白質(zhì)印跡法檢測TRAIL對SGC7901/ADR細胞中Mcl-1 蛋白表達的影響
    1.7 細胞轉(zhuǎn)染及Mcl-1-si RNA沉默效果的鑒定
    1.8 檢測轉(zhuǎn)染Mcl-1-si RNA后聯(lián)合應(yīng)用TRAIL對細胞活力、細胞凋亡和相關(guān)凋亡蛋白表達的影響
    1.9 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 TRAIL對SGC7901/ADR細胞活力和細胞凋亡的影響
    2.2 TRAIL上調(diào)SGC7901/ADR細胞中Mcl-1m RNA和蛋白的表達
    2.3 Mcl-1-si RNA抑制SGC7901/ADR細胞中Mcl-1 m RNA和蛋白的表達
    2.4 Mcl-1-si RNA抑制Mcl -1 基因的表達可增強TRAIL對SGC7901/ADR細胞增殖的抑制作用
    2.5 Mcl-1-si RNA抑制Mcl -1 基因表達可促進TRAIL誘導(dǎo)SGC7901/ADR細胞凋亡
    2.6 Mcl-1-si RNA抑制Mcl-1 表達對TRAIL誘導(dǎo)凋亡相關(guān)蛋白表達水平的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]TRAIL抑制胃癌多藥耐藥基因MDR1/P-gp的表達[J]. 王慧群,張開光.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2012(01)



本文編號：3518547