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生長停滯特異性基因6過表達在促進缺氧缺血骨髓間充質干細胞存活和心肌修復中的作用及機制研究

發(fā)布時間:2021-11-22 01:40
  第一部分生長抑制特異性基因6過表達促進缺氧缺血骨髓間充質干細胞存活目的:研究生長抑制特異性基因6過表達對缺氧缺血骨髓間充質干細胞存活的影響。方法:分離純化雄性Spraque-Dawley(SD)成年大鼠(200-250g)骨髓間充質干細胞(MSCs),流式細胞術鑒定其表面標志。逆轉錄腺病毒系統(tǒng)將轉導GFP基因和Gas6基因到MSCs(MSCGas6),并將編碼綠色熒光蛋白(GFP)基因的腺病毒空質粒轉染的MSCs作為對照組(MSCNull)。采用Western Blot和免疫熒光法檢測Gas6基因在MSCs中的表達情況。在缺氧條件下(95%氮和5%二氧化碳)培養(yǎng)24小時。隨后對細胞活力及凋亡情況進行評估,并定量檢測培養(yǎng)物上清液細胞損傷標志物乳酸脫氫酶(LDH)含量。通過結扎SD雌性大鼠冠狀動脈左前降支(LAD)產(chǎn)生心肌梗死。假手術組大鼠未進行冠狀動脈結扎。通過觀察結扎后左心室的蒼白變色和心電圖上的ST抬高來確認心肌梗死造模成功。在梗塞周圍區(qū)域的5個不同部位注射5×106個MSCNull或MSC

【文章來源】:華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:89 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
英文縮略詞表及中文對照
中文摘要
ABSTRACTS
前言
第一部分 生長抑制特異性基因6過表達促進缺氧缺血骨髓間充質干細胞存活
    材料與方法
    結果
    討論
    附圖
第二部分 生長抑制特異性基因6過表達促進間充質干細胞旁分泌減輕心肌細胞凋亡
    材料與方法
    結果
    討論
    附圖
第三部分 生長抑制特異性基因6修飾的間充質干細胞移植改善心功能異常并促進心臟修復
    材料及方法
    結果
    討論
    附圖
總論與創(chuàng)新
綜述
參考文獻
附錄
致謝



本文編號:3510676

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