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多重PCR技術(shù)結(jié)合基因芯片檢測(cè)致瀉性大腸桿菌的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-11-08 09:48
  目的:建立一種多重PCR技術(shù)結(jié)合基因芯片檢測(cè)的方式,對(duì)致瀉性大腸桿菌的結(jié)果進(jìn)行研究和必要分析。方法:本研究選取2019年3月-2020年3月本院進(jìn)行致瀉性大腸桿菌的病例,對(duì)多種致瀉性大腸桿菌進(jìn)行比較快速和準(zhǔn)確的檢測(cè)。對(duì)其中的腸致病性大腸桿菌、腸出血性大腸桿菌、侵襲性大腸桿菌和腸聚集性大腸桿菌及大腸桿菌O157的特異基因作為本次檢驗(yàn)的主要目的基因內(nèi)容。進(jìn)行相關(guān)的引物和探針設(shè)計(jì),并且需要對(duì)多重PCR擴(kuò)增處理,使得寡核苷酸芯片加以制備。將多重PCR的最終擴(kuò)增產(chǎn)物和其中具有特異特點(diǎn)的探針芯片進(jìn)行有效雜交處理。在進(jìn)行檢驗(yàn)的時(shí)候,需要使用掃描儀對(duì)患者加以必要掃描,從而對(duì)患者細(xì)菌的種類(lèi)及型別加以判斷和確認(rèn)。結(jié)果:在進(jìn)行腸致病性大腸桿菌(EPEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)、腸聚集性大腸桿菌(EAEC)和大腸桿菌O157檢測(cè)的時(shí)候,特異性比較良好,在進(jìn)行致病菌檢測(cè)的時(shí)候,其檢測(cè)的靈敏度能夠達(dá)到104cfu/m L。結(jié)論:所建立的多重PCR技術(shù)結(jié)合基因芯片檢測(cè)方法在進(jìn)行致瀉性大腸桿菌檢驗(yàn)的過(guò)程中,具有特異性好和靈敏度高以及比較實(shí)用等特點(diǎn)。 

【文章來(lái)源】:名醫(yī). 2020,(12)

【文章頁(yè)數(shù)】:2 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 引物的設(shè)計(jì)和探針的合成
        1.2.2 菌株的培養(yǎng)
        1.2.3 DNA的提取
        1.2.4 多重PCR擴(kuò)增
        1.2.5 基因芯片的雜交
        1.2.6 基因芯片的靈敏度檢測(cè)
2 結(jié)果
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]6類(lèi)致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測(cè)體系的建立[J]. 張明明,梁美丹,黃志深,勞嘉倩,肖劍.  食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào). 2019(14)
[2]食品中致瀉性大腸桿菌的毒力基因與血清型研究[J]. 付宇,吳曉敏,趙婧,孟慶敏,王彬,包名家.  中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2018(02)
[3]福建省延平區(qū)及永安市致瀉性大腸埃希菌監(jiān)測(cè)分析[J]. 楊勁松,鄭恩惠,林杰,羅朝晨,陳愛(ài)平.  中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2017(04)
[4]多重PCR試劑盒在檢測(cè)致瀉性大腸埃希菌中的應(yīng)用[J]. 林杰,鄭恩惠,楊勁松,陳愛(ài)平.  中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2017(06)
[5]2015年洛陽(yáng)市食品加工從業(yè)人員致瀉性大腸埃希氏菌帶菌狀況調(diào)查[J]. 仝志琴,李克偉,徐禮揚(yáng),李會(huì),楊曉燕,王玲玲.  現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2017(05)
[6]146株致瀉性大腸埃希菌多重PCR結(jié)果分析[J]. 鄭恩惠,李曲文,林杰,楊勁松,陳愛(ài)平.  預(yù)防醫(yī)學(xué)論壇. 2017(03)
[7]2011年-2013年杭州地區(qū)致瀉性大腸埃希菌的流行特征及耐藥性分析[J]. 周芳美,陳曉,余斐,程?hào)|慶,陳瑜.  中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2016(11)
[8]多重PCR方法鑒定六類(lèi)致瀉性大腸埃希菌和志賀菌[J]. 張網(wǎng),白向?qū)?趙愛(ài)蘭,許彥梅,熊衍文.  疾病監(jiān)測(cè). 2016(05)
[9]沈陽(yáng)地區(qū)致瀉性大腸埃希菌的多重PCR檢測(cè)及流行特征分析[J]. 于淼,薛惠昌,王卓,馮立,王立強(qiáng),吳益民.  中國(guó)病原生物學(xué)雜志. 2015(11)
[10]河南省5種致瀉性大腸埃希菌病原學(xué)監(jiān)測(cè)[J]. 趙嘉詠,朱敏,謝志強(qiáng),黃麗莉,穆玉姣,夏勝利,冉陸.  中國(guó)病原生物學(xué)雜志. 2015(10)

碩士論文
[1]腹瀉標(biāo)本中病原體快速檢測(cè)流程的建立與評(píng)價(jià)[D]. 管紅霞.中國(guó)疾病預(yù)防控制中心 2014
[2]2011-2013年杭州地區(qū)致瀉性大腸埃希菌的流行特征與耐藥性分析[D]. 周芳美.浙江大學(xué) 2014
[3]致瀉大腸埃希菌的分子分型和流行病學(xué)研究[D]. 孔海深.浙江大學(xué) 2011



本文編號(hào):3483494

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