油菜是世界上重要的食用油作物,中國(guó)目前每年菜籽油消費(fèi)量為610萬噸左右,約占食用植物油消費(fèi)量的20%。普通菜籽含油量在42%左右,含有7%的飽和脂肪酸（16:0和18:0）,60%左右的單不飽和脂肪酸（18:1）,以及33%左右的多不飽和脂肪酸（18:2和18:3）。多不飽和脂肪酸營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,但高含量的多不飽和脂肪酸使得菜籽油容易氧化、酸敗,產(chǎn)生揮發(fā)性、難聞的有害物質(zhì),從而降低菜籽油的營(yíng)養(yǎng)性和商品性。油酸營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,而且對(duì)心血管系統(tǒng)有保健作用,可降低心臟病,動(dòng)脈硬化的發(fā)生。高油酸菜籽油不容易氧化和酸敗,商品性較普通菜籽油更高。因此提高菜籽含油量和油酸含量是目前油菜科研一個(gè)重要的研究方向。脂酰-ACP硫脂酶（faty acyl-ACP thioesterase）是脂肪酸合成中一個(gè)重要的酶。在質(zhì)體中合成的脂肪酸在它的作用下水解成游離脂酰-CoA和ACP,從而達(dá)到終止了脂肪酸碳鏈延長(zhǎng)。油菜中有fatA和fatB兩個(gè)硫酯酶基因家族,且每個(gè)基因家族中有多個(gè)成員。脂酰-ACP硫脂酶不但影響種子中含油量的高低,還影響種子中脂肪酸組成。因此,研究油菜脂酰-ACP硫脂酶基因（fat）對(duì)于含油量和脂肪酸組... 

【文章來源】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
1 緒論
    1.1 脂酰-ACP硫脂酶(fatty acyl-[ACP]thioesterase)的種類與酶活性
    1.2 脂酰-ACP硫脂酶的結(jié)構(gòu)
        1.2.1 脂酰-ACP硫脂酶的一級(jí)結(jié)構(gòu)
        1.2.2 脂酰-ACP硫脂酶的二級(jí)結(jié)構(gòu)
    1.3 油菜中的脂酰-ACP硫脂酶在油脂合成過程中的作用
    1.4 脂酰-ACP硫脂酶的研究現(xiàn)狀
    1.5 脂酰-ACP硫脂酶基因在育種上的應(yīng)用
    1.6 本研究的意義
    1.7 本研究主要內(nèi)容
    1.8 技術(shù)路線
2 試驗(yàn)材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 基因及引物
        2.1.3 菌株及試劑
    2.2 方法
        2.2.1 試驗(yàn)材料的獲得
        2.2.2 總RNA的提取
        2.2.3 cDNA的合成
        2.2.4 RT-qPCR檢測(cè)
        2.2.5 脂酰-ACP硫酯酶基因CDS序列全長(zhǎng)的獲得
        2.2.6 載體連接
        2.2.7 酵母表達(dá)分析
        2.2.8 索氏抽提法測(cè)定酵母含油量
        2.2.9 擬南芥轉(zhuǎn)化
3 結(jié)果與分析
    3.1 RNA的提取
    3.2 脂酰-ACP硫脂酶基因表達(dá)分析
        3.2.1 引物特異性分析
        3.2.2 RT-qPCR結(jié)果
    3.3 脂酰-ACP硫脂酶基因的酵母表達(dá)分析
        3.3.1 脂酰-ACP硫脂酶基因CDS序列的獲得
        3.3.2 酵母表達(dá)載體構(gòu)建
        3.3.3 脂肪酸組成分析
    3.4 酵母含油量測(cè)定
    3.5 擬南芥轉(zhuǎn)化
4 討論
參考文獻(xiàn)
附錄
    附錄1 基因序列
    附錄2 引物序列
    附錄3 RNA提取方法
    附錄4 CDNA合成方法
    附錄5 膠回收方法
    附錄6 SOC培養(yǎng)基配置方法
    附錄7 YPD培養(yǎng)基配置方法
    附錄8 大腸桿菌質(zhì)粒提取
    附錄9 酵母菌質(zhì)粒提取
    附錄10 SC-Ura酵母缺陷型培養(yǎng)基配置方法
    附錄11 引物特異性分析
    附錄12 轉(zhuǎn)基因酵母脂肪酸組分分析
    附錄13 轉(zhuǎn)基因酵母含油量分析
致謝
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]中國(guó)油菜產(chǎn)業(yè)安全研究[D]. 王璐.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]甘藍(lán)型油菜SSR分子標(biāo)記圖譜構(gòu)建和油酸含量QTL定位[D]. 楊燕宇.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011

碩士論文
[1]生物柴油基因工程菌的構(gòu)建[D]. 范麗蘋.北京化工大學(xué) 2013
[2]甘藍(lán)型油菜FAD2、FAD3、FATB基因共干擾載體的構(gòu)建及其遺傳轉(zhuǎn)化[D]. 劉睿洋.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3483009