目的:研究人CCR4-NOT轉(zhuǎn)錄復合體亞基7（human CCR4-NOT transcription complex subunit 7,CNOT7）敲減通過JAK/STAT通路減少腫瘤來源的GM-CSF分泌,進而干預髓源性抑制細胞（Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs）在局部腫瘤免疫微環(huán)境的作用及相關機制。方法:1.ELISA法檢測肝癌、肝炎、健康志愿者外周血GM-CSF分泌水平及TTCS和NTCS中GM-CSF分泌水平,并進行比較;2.流式細胞術檢測腫瘤組織、瘤緣、非腫瘤正常肝組織中MDSCs數(shù)量;3.篩選合適肝癌細胞系;使用RNA干擾（RNAi）技術,將CNOT7重組質(zhì)粒及相應對照空載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HepG2細胞;4.Western blot方法檢測敲減組、空質(zhì)粒組和對照組CNOT7及信號傳導過程中STAT1、STAT3、GM-CSF的蛋白表達水平。結(jié)果:1.肝癌組、肝炎組、對照組外周血GM-CSF水平無明顯差異（P>0.05）。2.與腫瘤組（9.66±2.73 pg/ml）和正常肝組織組（11.61±2.89pg/ml）相比,瘤緣組（... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

外周血GM-CSF水平

圖 2-1 外周血 GM-CSF 水平2.1.2 腫瘤局部 GM-CSF 分泌水平檢測腫瘤組織培養(yǎng)上清液（TTCS）和非腫瘤組織培養(yǎng)上清液（NTCS），ELISA TTCS 和 NTCS 中 GM-CSF 分泌（圖 2-2）：可以觀察到瘤緣組（GM-CSF=32.8.90pg/ml），與腫瘤組（GM-CSF=9.66±2.73 pg/ml）相比，有統(tǒng)計學差異；瘤緣正常肝組織組（GM-CSF=11.61±2.89pg/ml）相比，有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）。

山西醫(yī)科大學碩士學位論文2.2 檢測肝癌免疫微環(huán)境 DMSCs 數(shù)量2.2.1 流式細胞術檢測結(jié)果取確診為肝細胞癌患者組織病理標本（n=10），流式細胞術檢測肝癌組織、癌腫邊緣組織、正常肝組織勻漿單細胞懸液，檢測各組 DMSCs（CD33＋CD11b＋）細胞比率，與肝癌組織組（4.16±2.22%）、正常肝組織組（6.22±2.29%）相比，瘤緣組（11.90±3.96%）中 CD33＋CD11b＋細胞比率明顯增多，具有統(tǒng)計學差異（P<0.05）。（圖 2-3）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]CNOT7基因敲減通過減少HepG2細胞TGF-β1分泌影響免疫微環(huán)境[J]. 郭舜,趙海潮,任曉靜,任崇仁,賀杰峰,趙浩亮.  中國醫(yī)科大學學報. 2019(03)



本文編號：3479835