基因在植物抵御水稻條紋病毒侵染過程中的功能研究
發(fā)布時(shí)間:2021-10-30 23:58
水稻條紋葉枯病由水稻條紋病毒(Rice stripe virus,RSV)引起,是水稻生產(chǎn)中重要的病毒病害之一,造成水稻產(chǎn)量與品質(zhì)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,威脅農(nóng)業(yè)生產(chǎn)安全,破壞農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展。研究RSV與寄主植物的互作機(jī)制,尋找調(diào)控RSV侵染的關(guān)鍵寄主因子,能夠?yàn)樗緱l紋葉枯病害的防治提供有效策略,減少水稻條紋葉枯病害的發(fā)生和危害。RSV通過灰飛虱(Lapdelphax striatellus,SBPH)在水稻群體中傳播,并可通過機(jī)械摩擦侵染實(shí)驗(yàn)寄主本氏煙。在實(shí)驗(yàn)室前期工作中,我們利用番茄基因芯片分析了 RSV侵染后本氏煙基因的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)芯片上番茄HIR3基因(BI923297)表達(dá)信號(hào)上調(diào)。過敏誘導(dǎo)反應(yīng)(HIR)基因家族與過敏反應(yīng)(HR)密切相關(guān),參與植物對(duì)病原物的防御反應(yīng)中。目前關(guān)于HIR的研究主要集中在HIR1參與植物抗細(xì)菌和真菌侵染過程,關(guān)于其他HIRs的功能研究較少,也不清楚HIRs是否參與植物抗病毒侵染的過程。本研究表明,RSV侵染誘導(dǎo)NbHIR3s表達(dá)上調(diào)。NbHIR3s沉默會(huì)加劇RSV侵染癥狀,并顯著增加病毒積累量,伴隨SA含量和SA途徑關(guān)鍵基因EDS1、NPR1和PR1基...
【文章來源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:130 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
RSV羞因組結(jié)構(gòu)((Cho,Lienetal.2013)
?圖2.1?Western?blot蛋白轉(zhuǎn)膜示意圖??Fig.2.1?Diagram?of?transfer?of?proteins?by?Western?blot??封閉及與一抗反應(yīng):??將硝酸纖維素膜放入合適平皿中,加適量封閉液,于水平搖床上室溫封閉
淀為包括細(xì)胞器和質(zhì)膜的總膜蛋白組份;??加入20〇MLBufferB,渦旋震蕩以重懸上述總膜蛋白組份。4°C,7800Xgin?(延長(zhǎng)離心時(shí)間可提高純度,防止細(xì)胞器膜污染)。沉淀為細(xì)胞器;??抽取上清液至新的EP管中,加入預(yù)冷的PBS1.6mL,混勻。16,000Xgmin?(延長(zhǎng)離心時(shí)間可提高產(chǎn)量)。棄上清,沉淀為質(zhì)膜蛋白。??亞細(xì)胞定位??定位載體的構(gòu)建??上文2.3.6所述方法,將本氏煙/、M>///幻.2和J/AWZJ基因閱讀框連接到定位載體pCV-eGFP-N丨和pCV-mcherry-Nl?(載體圖譜示)中,獲得?pCV:NbHIR3」-eGFP、pCV:NbHIR3.2-eGFP?和?pCV:AtNHL定位載體(圖2.4)。參照上文2.3.6.10所述方法,抽提陽(yáng)性質(zhì)粒。??XbaL??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]水稻條紋葉枯病發(fā)生規(guī)律與防治技術(shù)[J]. 楊曉婷. 黑龍江科技信息. 2014(18)
[2]黃瓜過敏性誘導(dǎo)反應(yīng)蛋白基因(CsHIR1)原核表達(dá)及其多克隆抗體制備[J]. 毛雙雙,李玉紅,周旋,李萬青,陳菲帆,程智慧,陳鵬. 西北植物學(xué)報(bào). 2014(05)
[3]花生HIR基因的克隆表達(dá)與進(jìn)化分析[J]. 劉羽,趙傳志,李長(zhǎng)生,李翠,王興軍. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(05)
[4]水稻條紋葉枯病的發(fā)生及防治[J]. 翟公山. 農(nóng)家參謀(種業(yè)大觀). 2013(11)
[5]水稻條紋葉枯病的防治[J]. 馮同強(qiáng),錢省,張君嶺,王曉瑩. 北京農(nóng)業(yè). 2013(27)
[6]水稻條紋葉枯病的發(fā)病規(guī)律與防治技術(shù)研究[J]. 李明桃. 農(nóng)業(yè)災(zāi)害研究. 2013(09)
[7]幾種重要植物次生代謝防御反應(yīng)物質(zhì)的生物合成途徑及分子調(diào)控機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 楊欣,徐艷紅,魏建和,劉娟,張巖. 生物技術(shù)通訊. 2013(02)
[8]擬南芥T1N622在抵抗Pst DC3000侵染過程中的功能分析[J]. 郝叢叢,鄭會(huì)欣,賈嬌,司賀龍,陳展,趙斌,張靖,邢繼紅,董金皋. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(04)
[9]中國(guó)水稻條紋葉枯病研究進(jìn)展[J]. 周益軍,李碩,程兆榜,周彤,范永堅(jiān). 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2012(05)
[10]水稻OsBBR1基因的白葉枯病抗性研究[J]. 董瑞仙,王栩鳴,嚴(yán)成其,陳劍平. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2011(06)
碩士論文
[1]水稻條紋病毒侵染擬南芥的研究[D]. 苑俠.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
本文編號(hào):3467661
【文章來源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:130 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
RSV羞因組結(jié)構(gòu)((Cho,Lienetal.2013)
?圖2.1?Western?blot蛋白轉(zhuǎn)膜示意圖??Fig.2.1?Diagram?of?transfer?of?proteins?by?Western?blot??封閉及與一抗反應(yīng):??將硝酸纖維素膜放入合適平皿中,加適量封閉液,于水平搖床上室溫封閉
淀為包括細(xì)胞器和質(zhì)膜的總膜蛋白組份;??加入20〇MLBufferB,渦旋震蕩以重懸上述總膜蛋白組份。4°C,7800Xgin?(延長(zhǎng)離心時(shí)間可提高純度,防止細(xì)胞器膜污染)。沉淀為細(xì)胞器;??抽取上清液至新的EP管中,加入預(yù)冷的PBS1.6mL,混勻。16,000Xgmin?(延長(zhǎng)離心時(shí)間可提高產(chǎn)量)。棄上清,沉淀為質(zhì)膜蛋白。??亞細(xì)胞定位??定位載體的構(gòu)建??上文2.3.6所述方法,將本氏煙/、M>///幻.2和J/AWZJ基因閱讀框連接到定位載體pCV-eGFP-N丨和pCV-mcherry-Nl?(載體圖譜示)中,獲得?pCV:NbHIR3」-eGFP、pCV:NbHIR3.2-eGFP?和?pCV:AtNHL定位載體(圖2.4)。參照上文2.3.6.10所述方法,抽提陽(yáng)性質(zhì)粒。??XbaL??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]水稻條紋葉枯病發(fā)生規(guī)律與防治技術(shù)[J]. 楊曉婷. 黑龍江科技信息. 2014(18)
[2]黃瓜過敏性誘導(dǎo)反應(yīng)蛋白基因(CsHIR1)原核表達(dá)及其多克隆抗體制備[J]. 毛雙雙,李玉紅,周旋,李萬青,陳菲帆,程智慧,陳鵬. 西北植物學(xué)報(bào). 2014(05)
[3]花生HIR基因的克隆表達(dá)與進(jìn)化分析[J]. 劉羽,趙傳志,李長(zhǎng)生,李翠,王興軍. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(05)
[4]水稻條紋葉枯病的發(fā)生及防治[J]. 翟公山. 農(nóng)家參謀(種業(yè)大觀). 2013(11)
[5]水稻條紋葉枯病的防治[J]. 馮同強(qiáng),錢省,張君嶺,王曉瑩. 北京農(nóng)業(yè). 2013(27)
[6]水稻條紋葉枯病的發(fā)病規(guī)律與防治技術(shù)研究[J]. 李明桃. 農(nóng)業(yè)災(zāi)害研究. 2013(09)
[7]幾種重要植物次生代謝防御反應(yīng)物質(zhì)的生物合成途徑及分子調(diào)控機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 楊欣,徐艷紅,魏建和,劉娟,張巖. 生物技術(shù)通訊. 2013(02)
[8]擬南芥T1N622在抵抗Pst DC3000侵染過程中的功能分析[J]. 郝叢叢,鄭會(huì)欣,賈嬌,司賀龍,陳展,趙斌,張靖,邢繼紅,董金皋. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(04)
[9]中國(guó)水稻條紋葉枯病研究進(jìn)展[J]. 周益軍,李碩,程兆榜,周彤,范永堅(jiān). 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2012(05)
[10]水稻OsBBR1基因的白葉枯病抗性研究[J]. 董瑞仙,王栩鳴,嚴(yán)成其,陳劍平. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2011(06)
碩士論文
[1]水稻條紋病毒侵染擬南芥的研究[D]. 苑俠.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
本文編號(hào):3467661
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