水稻條紋葉枯病由水稻條紋病毒（Rice stripe virus,RSV）引起,是水稻生產(chǎn)中重要的病毒病害之一,造成水稻產(chǎn)量與品質(zhì)嚴重的經(jīng)濟損失,威脅農(nóng)業(yè)生產(chǎn)安全,破壞農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展。研究RSV與寄主植物的互作機制,尋找調(diào)控RSV侵染的關鍵寄主因子,能夠為水稻條紋葉枯病害的防治提供有效策略,減少水稻條紋葉枯病害的發(fā)生和危害。RSV通過灰飛虱（Lapdelphax striatellus,SBPH）在水稻群體中傳播,并可通過機械摩擦侵染實驗寄主本氏煙。在實驗室前期工作中,我們利用番茄基因芯片分析了 RSV侵染后本氏煙基因的表達情況,發(fā)現(xiàn)芯片上番茄HIR3基因（BI923297）表達信號上調(diào)。過敏誘導反應（HIR）基因家族與過敏反應（HR）密切相關,參與植物對病原物的防御反應中。目前關于HIR的研究主要集中在HIR1參與植物抗細菌和真菌侵染過程,關于其他HIRs的功能研究較少,也不清楚HIRs是否參與植物抗病毒侵染的過程。本研究表明,RSV侵染誘導NbHIR3s表達上調(diào)。NbHIR3s沉默會加劇RSV侵染癥狀,并顯著增加病毒積累量,伴隨SA含量和SA途徑關鍵基因EDS1、NPR1和PR1基... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：130 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

RSV羞因組結構((Cho,Lienetal.2013)

?圖２．１?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ蛋白轉(zhuǎn)膜示意圖??Ｆｉｇ．２．１?Ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｒａｎｓｆｅｒ?ｏｆ?ｐｒｏｔｅｉｎｓ?ｂｙ?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ??封閉及與一抗反應：??將硝酸纖維素膜放入合適平皿中，加適量封閉液，于水平搖床上室溫封閉

淀為包括細胞器和質(zhì)膜的總膜蛋白組份；??加入２０〇ＭＬＢｕｆｆｅｒＢ，渦旋震蕩以重懸上述總膜蛋白組份。４°Ｃ，７８００Ｘｇｉｎ?（延長離心時間可提高純度，防止細胞器膜污染）。沉淀為細胞器；??抽取上清液至新的ＥＰ管中，加入預冷的ＰＢＳ１．６ｍＬ，混勻。１６，０００Ｘｇｍｉｎ?（延長離心時間可提高產(chǎn)量）。棄上清，沉淀為質(zhì)膜蛋白。??亞細胞定位??定位載體的構建??上文２．３．６所述方法，將本氏煙／、Ｍ＞／／／幻．２和Ｊ／ＡＷＺＪ基因閱讀框連接到定位載體ｐＣＶ－ｅＧＦＰ－Ｎ丨和ｐＣＶ－ｍｃｈｅｒｒｙ－Ｎｌ?（載體圖譜示）中，獲得?ｐＣＶ：ＮｂＨＩＲ３」－ｅＧＦＰ、ｐＣＶ：ＮｂＨＩＲ３．２－ｅＧＦＰ?和?ｐＣＶ：ＡｔＮＨＬ定位載體（圖２．４）。參照上文２．３．６．１０所述方法，抽提陽性質(zhì)粒。??ＸｂａＬ??

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3467661