本文關鍵詞：大鯢性腺發(fā)育及Sox14基因表達特性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：大鯢(Megalobatrachusdavidianus)是我國特有珍稀兩棲動物,具有很高的藥用價值、食用價值、經(jīng)濟價值和科學研究價值,然而野生大鯢資源量因自然環(huán)境的破壞和大量非法捕殺急劇下降,已成為國家二類保護水生野生動物。21世紀初,隨著大鯢資源的進一步衰減和市場售價的攀升,大鯢人工養(yǎng)殖逐漸興起,目前已成為部分地區(qū)的特色產(chǎn)業(yè)。但受制于對大鯢繁殖基礎研究不足,加之大鯢性腺發(fā)育和繁殖的獨特性,使得大鯢人工繁殖技術一直沒有大的突破,其中親鯢性腺發(fā)育慢、雄鯢成熟度差導致的繁殖率低,一直是大鯢繁育技術的瓶頸。為深入了解大鯢性腺發(fā)育規(guī)律和繁殖特性。本實驗對大鯢腦垂體和精巢的組織特點,親鯢的激素水平和代謝強度,以及Sox14基因的結構和表達特性進行了初步研究,獲得如下結果:1.通過組織切片觀察,結果顯示:與魚類及其他兩棲動物相似,大鯢腦垂體包括神經(jīng)垂體和腺垂體兩部分。腺垂體分為結節(jié)部、中間部和遠側部,大鯢腺垂體中間部較發(fā)達,遠側部內(nèi)按細胞嗜色性可分為嗜堿區(qū)、嗜酸區(qū)和混合區(qū)。大鯢精細管管腔狹長,精細管互相交錯形成精巢網(wǎng),這可能是大鯢排精量少、排精難的原因。大鯢同一個體性腺中精細胞發(fā)育不同步,不同個體之間性腺發(fā)育也不同步,造成大鯢人工繁殖過程中催產(chǎn)率、受精率低等問題。2.激素水平檢測發(fā)現(xiàn),大鯢性腺發(fā)育表現(xiàn)出三個特點:(1)成熟雌雄大鯢性腺發(fā)育規(guī)律基本一致,表現(xiàn)為春季隨溫度上升血清激素水平升高,且均在6月達到峰值,其后開始下降。表明人工養(yǎng)殖條件下雌雄親鯢性腺發(fā)育較為同步,但繁殖期較短;(2)成熟雌雄大鯢性腺發(fā)育對溫度的敏感性不同,其中睪酮隨溫度變化表現(xiàn)出劇烈變化,而雌二醇變化相對平緩。表明雄性性腺發(fā)育對溫度更加敏感;(3)成熟雌雄大鯢生殖激素水平差異較大,3.血清生化指標檢測表明,雌性大鯢的總膽固醇、甘油三酯、高密度膽固醇、低密度膽固醇含量總體水平顯著高于雄性(P0.05),這些生化指標的雌雄差異對大鯢的雌雄鑒定和性腺發(fā)育時期鑒定具有指導意義。雌雄大鯢血清尿素含量的峰值不同步出現(xiàn),可能是雌雄大鯢性腺發(fā)育不同步的原因之一。4.大鯢激素敏感性實驗表明,成熟雌雄大鯢均對HCG敏感,注射后24h激素水平達到最高,其后開始下降,48小時后下降至較低水平;但雌雄成熟大鯢對LH-A2均不敏感,注射后48小時無顯著變化。表明,HCG更適合用于大鯢人工催產(chǎn)。5.大鯢Sox14基因生物信息學和表達特性研究表明,大鯢SOX14基因cDNA全長1470bp,其中ORF720 bp,編碼239個氨基酸,編碼蛋白分子量為26.75kd,等電點為9.68,無信號肽和跨膜螺旋區(qū),與熱帶爪蟾(X.topiciles)同源性為91%,與魚類、人類等遠源物種相似度都在80~90%之間。主要在性成熟大鯢性腺組織高表達,并隨年齡的增加表達量增多。以上研究結果表明:1.大鯢腦垂體精巢內(nèi)生殖細胞發(fā)育不同步可能是造成大鯢繁殖率低的主要原因;2.人工養(yǎng)殖大鯢性腺發(fā)育基本同步,但雄性大鯢對溫度變化更為敏感,二者均對HCG敏感,HCG可用于大鯢人工催產(chǎn);3.大鯢Sox14基因主要在性成熟大鯢的性腺中表達,和大鯢性腺發(fā)育相關,可作為大鯢性腺發(fā)育標志基因。
【關鍵詞】：大鯢 性腺發(fā)育 生殖激素 代謝強度 Sox14
【學位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S917.4
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-12
• 第一章 文獻綜述12-20
• 1.1 大鯢的研究進展12-19
• 1.1.1 大鯢腦垂體和精巢形態(tài)結構的研究進展12-13
• 1.1.2 性激素對大鯢性腺發(fā)育影響的研究13-16
• 1.1.3 雌雄大鯢生理代謝強度差異及其變化規(guī)律的研究進展16
• 1.1.4 雌雄大鯢體征差異的研究進展16-17
• 1.1.5 大鯢Sox14基因的研究進展17-19
• 1.2 研究的目的及意義19-20
• 第二章 大鯢垂體和精巢形態(tài)結構觀察20-26
• 2.1 引言20
• 2.2 材料和方法20-21
• 2.2.1 實驗動物20
• 2.2.2 實驗材料和設備20
• 2.2.3 主要試劑20
• 2.2.4 實驗方法20-21
• 2.3 實驗結果21-24
• 2.3.1 大鯢腦垂體形態(tài)結構觀察21-22
• 2.3.2 大鯢精巢的形態(tài)和結構觀察22-24
• 2.4 討論24-25
• 2.4.1 大鯢腦垂體的形態(tài)結構觀察24
• 2.4.2 大鯢精巢的形態(tài)結構觀察24-25
• 2.5 小結25-26
• 第三章 大鯢生殖激素變化規(guī)律及血清生化指標測定26-35
• 3.1 引言26
• 3.2 材料與方法26-28
• 3.2.1 實驗動物26
• 3.2.2 實驗設備和耗材26-27
• 3.2.3 試驗方法27-28
• 3.3 實驗結果28-32
• 3.3.1 大鯢生殖激素季節(jié)變化規(guī)律28-29
• 3.3.2 雌雄大鯢血清生化指標差異和變化規(guī)律29-31
• 3.3.3 大鯢對兩種催情劑的敏感性31
• 3.3.4 雌雄大鯢體型特征差異31-32
• 3.4 討論32-34
• 3.4.1 大鯢生殖激素變化規(guī)律32-33
• 3.4.2 雌雄大鯢血清生化指標差異及變化規(guī)律33-34
• 3.4.3 大鯢對兩種催情劑的敏感性實驗34
• 3.5 小結34-35
• 第四章 大鯢Sox14基因的表達研究35-46
• 4.1 引言35
• 4.2 材料和方法35-37
• 4.2.1 實驗材料35-36
• 4.2.2 實驗方法36-37
• 4.3 實驗結果37-44
• 4.3.1 大鯢Sox14基因的生物信息學分析37-43
• 4.3.2 大鯢Sox14基因的組織表達43
• 4.3.3 大鯢Sox14在不同發(fā)育階段的表達43-44
• 4.4 討論44-45
• 4.4.1 大鯢Sox14基因的生物信息學分析及進化分析44
• 4.4.2 大鯢Sox14基因的組織表達44-45
• 4.5 小結45-46
• 第五章 結論與創(chuàng)新點46-48
• 結論46-47
• 創(chuàng)新點47-48
• 參考文獻48-52
• 附錄52-56
• 致謝56-57
• 作者簡介57

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