MYB轉(zhuǎn)錄因子家族作為植物最大的轉(zhuǎn)錄因子家族之一,參與植物的整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程,在植物應(yīng)答外界逆境脅迫中非常重要。本研究以小黑楊（Populus simsonii×Pnigra）為材料,從本實(shí)驗(yàn)室前期篩選出的耐鹽基因中,選擇PsnMYB108基因作為研究對(duì)象進(jìn)行基因功能分析。結(jié)果如下:從小黑楊葉片中克隆出954bp的PsnMYB108基因的cDNA片段,其編碼的蛋白含有317個(gè)氨基酸,屬于不穩(wěn)定的親水蛋白,不存在信號(hào)肽,不具跨膜能力,含兩個(gè)MYB家族保守結(jié)構(gòu)域。系統(tǒng)進(jìn)化樹表明,小黑楊PsnMYB108蛋白與毛果楊MYB108蛋白及胡楊、榴蓮、茶花、銀白楊、向日葵的MYB108-like蛋白具有較近的遺傳距離。PsnMYB108啟動(dòng)子中含有與植物抗逆相關(guān)的順式作用元件。亞細(xì)胞定位結(jié)果表明,PsnMYB108蛋白定位于細(xì)胞核中。PsnMYB108基因表達(dá)具有組織特異性,并受脅迫誘導(dǎo)表達(dá)。PsnMYB108基因在根中的相對(duì)表達(dá)水平明顯比在莖和葉中表達(dá)水平高。在鹽脅迫下,PsnMYB108基因表現(xiàn)上調(diào)表達(dá)。表明PsnMYB108基因可能與植物應(yīng)答高鹽脅迫相關(guān)。將PsnMYB108基因 ORF 分... 

【文章來(lái)源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２小黑楊ＰｗＭＺＷｆＷ基因的全長(zhǎng)??Ｆｉｇ．２－２?Ｆｕｌｌ?ｌｅｎｇｔｈ?ｏｉＰｓｎＭＹＢ１０８?ｇｅｎｅ??

２小黑楊ＰｓｎＭＶＴＷＪＯＳ基因的克隆及表達(dá)分析??謂??圖２－１小黑楊葉片總ＲＮＡ瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ａｇａｒｏｓｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｐｏｐｕｌｕｓ?ｓｉｍｏｎｉｉ＾ＲｎｉｇＪ－ａ?ｌｅａｖｅ??２．?３．?２小黑楊Ｐｓａ？／ＷＫＳ：ＺＯＳ基因的克隆??將小黑楊ＲＮＡ反轉(zhuǎn)錄得到的ｃＤＮＡ稀釋１０倍后作為模板，以ＰｏｔＭＦＢ／似－Ｆ、??乃《從７５７仰－Ｒ為引物進(jìn)行ＰＣＲ擴(kuò)增，擴(kuò)增出一條長(zhǎng)度為９５４ｂｐ的ＤＮＡ片段（圖??２－２）。??ｔｖｔｅｒｋｅｒ?ＰｓｎＭＹＢ１０８??１０００ｂｐ???７５０ｂｐ?——?＾４ｂＰ??５〇〇ｂｐ?—??２５０ｂｐ????？ｂｐ?１??Ｈ??圖２－２小黑楊ＰｗＭＺＷｆＷ基因的全長(zhǎng)??Ｆｉｇ．２－２?Ｆｕｌｌ?ｌｅｎｇｔｈ?ｏｉＰｓｎＭＹＢ１０８?ｇｅｎｅ??將小黑楊徹基因與ｐＭＤ１９－Ｔ載體相連接，并導(dǎo)入大腸桿菌，挑取??５個(gè)白色斑點(diǎn)，搖菌后進(jìn)行ＰＣＲ反應(yīng)，電泳檢測(cè)后仍能在凝膠成像儀下觀察到??９５４ｂｐ長(zhǎng)度片段，選擇目的條帶正確菌液送至生工測(cè)序，結(jié)果比對(duì)正確，表明??尸ＭＭ７５７０Ｓ基因與ｐＭＤ１９－Ｔ載體連接成功（圖２－３）。保留測(cè)序成功菌液備用。??２０??

東北林業(yè)大學(xué)碩士論文??Ｍ?１?２?３?４?５??２０００ｈｐ???１０ＯＯｂｐ???７ｓ〇ｂｐ??????２５０ｂｐ?一??１〇〇ｂｐ?－??圖２－３小黑楊／＾？Ｍｒａ７似基因與ｐＭＤ１９－Ｔ載體連接菌液ＰＣＲ??Ｆｉｇ．２－３?ＰＣＲ?ｏｆ?ＰｓｎＭＹＢ１０８?ｇｅｎｅ?ｌｉｎｋｅｄ?ｔｏ?Ｔ?ｖｅｃｔｏｒ??２．?３．?３小黑楊ＰＳ／７／ＷＹ８彳ＯＳ基因生物信息學(xué)分析??２．?３．?３．?１小黑楊ＰｓｎＭＹＢ１０８蛋白基本理化性質(zhì)分析及二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)??從小黑楊ｃＤＮＡ模板中克隆獲得９５４ｂｐ的基因ｃＤＮＡ片段，編??碼３１７個(gè)氨基酸，含２０種氨基酸（圖２－４），具完整的開放閱讀框。ＰｓｎＭＹＢ１０８??蛋白的化學(xué)式ＳＣ１５６９Ｈ２４ｍＮ４５５０?４９６Ｓ１６，等電點(diǎn)（ＰＩ）為５．９３，不穩(wěn)定系數(shù)為４９．３１，??屬于不穩(wěn)定蛋白。??１２１?１０．１??藝?１〇－?６．２??Ｗ?３－５．６?６．３?ｓ?５＇９?５．３??４ｆｌ?，?＿?５７?５?５??菡?Ｉ?Ｉ?ａ?■?＾４－１?３?２４＇１?４４?？３．Ｓ４４??５?ｌｌｌｌｌｄｌｌｍＨ．ｉｌｌｉｉｉ??嘗１１＾５５０��！蘭３昱１１１沒(méi)ｆ蘭蘭５??圖２－４?ＰｓｎＭＹＢ１０８蛋白編碼氨基酸含量??Ｆｉｇ．２－４?Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＰｓｎＭＹＢ１０８?ｐｒｏｔｅｉｎ??利用在線軟件ＳＯＰＭＡ對(duì)小黑楊ＰｓｎＭＹＢ１０８蛋白的氨基酸序列進(jìn)行二級(jí)結(jié)??構(gòu)預(yù)測(cè)，結(jié)果表明該蛋白主要由無(wú)規(guī)則卷曲（５３．７７％）、ａ－螺旋（３９．６２％）、??延伸鏈（４．４０％）、Ｂ－折疊（２．２０％）組成（圖?２－５，表?２－

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]鹽脅迫下根瘤共生豌豆植株對(duì)外源鈣的生理響應(yīng)[J]. 馬紹英,馬蕾,徐勃,楊寧,張旭輝,柴強(qiáng),李勝.  應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào). 2020(03)
[2]鹽堿地土壤利用與改良研究進(jìn)展[J]. 楊玉坤,耿計(jì)彪,于起慶,王嘉,于文勇,趙薇.  農(nóng)業(yè)與技術(shù). 2019(24)
[3]轉(zhuǎn)錄組測(cè)序在林草植物抗逆性研究中的應(yīng)用[J]. 高慧娟,呂昕培,王潤(rùn)娟,任偉,程濟(jì)南,汪永平,邵坤仲,張金林.  草業(yè)學(xué)報(bào). 2019(12)
[4]鹽堿脅迫對(duì)植物形態(tài)和生理生化影響及植物響應(yīng)的研究進(jìn)展[J]. 焦德志,趙澤龍.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(20)
[5]中國(guó)水稻遺傳學(xué)研究進(jìn)展與分子設(shè)計(jì)育種[J]. 郭韜,余泓,邱杰,李家洋,韓斌,林鴻宣.  中國(guó)科學(xué):生命科學(xué). 2019(10)
[6]植物對(duì)鹽脅迫的響應(yīng)及耐鹽調(diào)控的研究進(jìn)展[J]. 王康君,樊繼偉,陳鳳,李強(qiáng),孫中偉,郭明明,張廣旭,鄭國(guó)良.  江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2018(12)
[7]中間錦雞兒CiMYB15基因正調(diào)控?cái)M南芥黃酮代謝[J]. 柴文娟,楊杞,李國(guó)婧,王瑞剛.  中國(guó)生物工程雜志. 2018(10)
[8]我國(guó)鹽堿地綠化研究進(jìn)展與展望[J]. 朱建峰,崔振榮,吳春紅,鄧丞,陳軍華,張華新.  世界林業(yè)研究. 2018(04)
[9]中國(guó)科學(xué)院新疆生態(tài)與地理研究所在植物抗逆分子育種候選基因研究方面獲進(jìn)展[J].   干旱區(qū)地理. 2017(02)
[10]荷花R2R3-MYB轉(zhuǎn)錄因子NnMYB4對(duì)擬南芥木質(zhì)素合成的影響[J]. 李針針,劉兆磊,陳發(fā)棣,蔣甲福,陳素梅.  南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(06)

博士論文
[1]棉花R2R3-MYB基因家族海陸種間序列變異及與纖維性狀的相關(guān)性分析[D]. 王諾菡.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2019
[2]玫瑰MYB轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控類黃酮介導(dǎo)的逆境響應(yīng)機(jī)制研究[D]. 申玉曉.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[3]棉花基因GhWRKY6-like和GhMYB108-like在非生物逆境方面的功能解析[D]. ABID ULLAH.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[4]毛竹生殖器官發(fā)育相關(guān)miRNA挖掘與miR159-GAMYB途徑對(duì)花藥發(fā)育調(diào)控研究[D]. 侯丹.中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院 2018
[5]植物激素脫落酸的受體蛋白PYL8和PYL9通過(guò)結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子MYB家族成員調(diào)控?cái)M南芥的側(cè)根生長(zhǎng)[D]. 邢璐.中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué) 2016
[6]楊樹轉(zhuǎn)錄因子ERF76基因耐鹽功能研究[D]. 姚文靜.東北林業(yè)大學(xué) 2016
[7]白樺BplMYB46基因調(diào)控抗旱耐鹽和次生壁形成的分子機(jī)理[D]. 國(guó)會(huì)艷.東北林業(yè)大學(xué) 2014

碩士論文
[1]擬南芥MYB6調(diào)控莖頂端生長(zhǎng)點(diǎn)大小的機(jī)制研究[D]. 劉祥政.山東大學(xué) 2019
[2]丹參SmMYB36基因?qū)祁惡捅奖榇x途徑調(diào)控的研究[D]. 趙英.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2019
[3]小麥轉(zhuǎn)錄因子TaMYB108基因的克隆、表達(dá)分析及耐鹽功能的研究[D]. 王睿斌.華中科技大學(xué) 2017
[4]84K楊轉(zhuǎn)錄因子NAC57基因耐鹽脅迫功能分析[D]. 李晰妍.東北林業(yè)大學(xué) 2017
[5]桑樹MYB轉(zhuǎn)錄因子家族的生物信息學(xué)及黃酮合成相關(guān)基因的表達(dá)分析[D]. 陳泓宇.西南大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3461447