發(fā)布時間：2021-10-27 05:37

　　目的:構(gòu)建戊二酰輔酶A脫氫酶（GCDH）基因敲除大鼠,為進一步研究戊二酸尿癥Ⅰ型發(fā)病機制和治療方法提供動物模型。方法:利用轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應物核酸酶（TALEN）技術(shù)制備GCDH基因敲除大鼠,設(shè)計GCDH基因打靶位點,構(gòu)建載體,體外轉(zhuǎn)錄mRNA,顯微注射入SD大鼠受精卵,鑒定F0代大鼠。經(jīng)飼養(yǎng)、配種、繁殖后,剪尾、PCR及電泳檢測子代大鼠基因型,觀察并統(tǒng)計GCDH基因敲除幼鼠出生及存活情況。高賴氨酸飲食誘導GCDH^-/-大鼠發(fā)病,HE染色觀察大鼠腦組織的病理變化。結(jié)果:經(jīng)基因檢測及測序驗證,成功制備GCDH^-/-大鼠,子代大鼠基因型符合孟德爾遺傳定律并可穩(wěn)定繁殖。8周齡GCDH^-/-大鼠給予高賴氨酸飼料喂養(yǎng)4周,5只中存活4只;同等條件的5只野生大鼠全部存活率。與野生型相比,高賴氨酸飲食GCDH^-/-大鼠腦出現(xiàn)細胞水腫、排列紊亂和空泡樣變性。結(jié)論:成功建立GCDH^-/-大鼠模型。 

【文章來源】：鄭州大學學報(醫(yī)學版). 2020,55(06)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

GCDH基因敲除mRNA電泳圖

F0代大鼠基因型

GCDH基因敲除雜合子子代基因型分別為純合子、雜合子、野生型3種,基因鑒定結(jié)果見圖3。其中1、2、3為GCDH-/-大鼠,4、5、6、9為GCDH-/+大鼠,7、8、10為野生型大鼠。2.3 GA-Ⅰ大鼠模型的死亡率

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Retake the Center Stage-New Development of Rat Genetics[J]. Kindiya Geghman,Sushila Shenoy.  遺傳學報. 2012(06)



本文編號：3460980