香梨優(yōu)斑螟是新疆林果業(yè)重要害蟲(chóng)之一,以老熟幼蟲(chóng)在翹皮或?yàn)楹μ幵蕉?為探索香梨優(yōu)斑螟滯育期間越冬幼蟲(chóng)的滯育特征,選擇抗寒性相關(guān)基因—熱激蛋白基因、脂肪酸去飽和酶基因、和其它滯育期關(guān)聯(lián)基因如精氨酸激酶、乙酰輔酶A羧化酶、脂肪酸合酶、糖原磷酸化酶、己糖激酶和氨基酸為研究對(duì)象,研究其表達(dá)或變化規(guī)律,旨在促進(jìn)探究香梨優(yōu)斑螟滯育機(jī)制,為香梨優(yōu)斑螟防控提供新思路。（1）香梨優(yōu)斑螟滯育期及低溫脅迫的內(nèi)參基因篩選:在4℃低溫脅迫下香梨優(yōu)斑螟內(nèi)參基因穩(wěn)定性是UBQ>GAPDH>Actin>18s>TUB;在不同低溫脅迫1h時(shí)香梨優(yōu)斑螟內(nèi)參基因的穩(wěn)定性從大到小依次為UBQ>18s>GAPDH>Actin>TUB;在滯育過(guò)程中香梨優(yōu)斑螟內(nèi)參基因的穩(wěn)定性依次為GAPDH>18s>UBQ>TUB>Actin。香梨優(yōu)斑螟在短期溫度脅迫時(shí)可選擇UBQ作為內(nèi)參基因,滯育研究中GAPDH作為內(nèi)參基因比較理想。（2）熱激蛋白（HSP60、HSP70、HSP90）基因表達(dá)特征:4℃低溫脅迫后HSPs基因表達(dá)顯著上調(diào),1h達(dá)到最高峰值,3h后下降再上升,其... 

【文章來(lái)源】：塔里木大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

所有滯育期及不同處理的RNA電泳圖（每3個(gè)生物學(xué)重復(fù)之間隨機(jī)選取一個(gè)）

塔里木大學(xué)碩士學(xué)位論文第三章結(jié)果與分析2718sTUBActinGAPDHUBQ圖3-2內(nèi)參基因的溶解曲線Fig.3-2Dissolutioncurveofreferencegene表3-1擴(kuò)增效率Table3-1PCRefficiency基因Gene線性相關(guān)系數(shù)R2Correlationcoefficient擴(kuò)增效率(%)PCRefficiencyActin0.995998.77TUB0.9968105.88GAPDH0.9944110.4118s0.9886105.03UBQ0.994490.263.1.3內(nèi)參基因穩(wěn)定性分析3.1.3.1不同滯育期及處理下內(nèi)參基因的表達(dá)水平（1）不同時(shí)期香梨優(yōu)斑螟5個(gè)內(nèi)參基因不同時(shí)期的Ct值較為穩(wěn)定，變化趨勢(shì)差異不大。18s內(nèi)參基因表達(dá)豐度最高，Ct值5.87-6.89，GAPDH、Actin、TUB和UBQ基因表達(dá)豐度相對(duì)

塔里木大學(xué)碩士學(xué)位論文第三章結(jié)果與分析28較低，Ct值14.01-20.54之間,總體趨勢(shì)平穩(wěn)，無(wú)明顯的高表達(dá)或低表達(dá)現(xiàn)象(圖3-3)。圖3-3不同時(shí)期內(nèi)參基因Ct值變化趨勢(shì)Fig.3-3ChangesofCtvaluesofreferencegenesindifferentperiods（2）低溫處理不同時(shí)長(zhǎng)香梨優(yōu)斑螟5個(gè)內(nèi)參基因在低溫處理不同時(shí)長(zhǎng)下的Ct值也較為穩(wěn)定，但在3h和24h時(shí)出現(xiàn)幅度較大波動(dòng)，相比不同時(shí)期的表達(dá)，Ct值的穩(wěn)定程度有一定下降。18s內(nèi)參基因表達(dá)豐度依然是最高，Ct值5.87-6.89，GAPDH、Actin、TUB和UBQ基因表達(dá)豐度相對(duì)18s較低，Ct值14.01-20.54之間，于24h有較明顯波動(dòng)，Ct值增大，表達(dá)量降低，可能由于低溫時(shí)間過(guò)長(zhǎng)影響mRNA(圖3-4)。圖3-4低溫處理不同時(shí)長(zhǎng)內(nèi)參基因Ct值變化趨勢(shì)Fig.3-4ChangetrendofCtvalueofinternalreferencegeneinlowtemperaturetreatment（3）不同低溫處理香梨優(yōu)斑螟5個(gè)內(nèi)參基因在不同低溫處理下的Ct值也較為穩(wěn)定，未出現(xiàn)明顯的起伏。18s內(nèi)參基因表達(dá)豐度依然是最高，Ct值8.12-12.54，GAPDH、Actin、TUB和UBQ基因表達(dá)豐度相對(duì)18s較低，Ct值17.33-26.41之間,總體趨勢(shì)平穩(wěn)，程度間于不同時(shí)期

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]香梨優(yōu)斑螟越冬幼蟲(chóng)的生化指標(biāo)動(dòng)態(tài)變化研究[D]. 龐竟公.塔里木大學(xué) 2018
[3]脂肪酸合酶及�；�-CoAΔ11去飽和酶在七星瓢蟲(chóng)滯育中的功能研究[D]. 韓艷華.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2018
[4]黃粉蟲(chóng)脂肪酸合成關(guān)鍵基因的發(fā)育表達(dá)以及超長(zhǎng)鏈脂肪酸延伸酶的功能研究[D]. 鄭天祥.浙江農(nóng)林大學(xué) 2017
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[7]七星瓢蟲(chóng)雌成蟲(chóng)滯育相關(guān)蛋白差異表達(dá)的研究[D]. 劉遙.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2014
[8]麥紅吸漿蟲(chóng)Hsp90和Hsp70基因的克隆與滯育不同時(shí)期的表達(dá)[D]. 李丹.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
[9]亞洲玉米螟糖原磷酸化酶基因的克隆及表達(dá)分析[D]. 郭建青.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013
[10]亞洲玉米螟越冬幼蟲(chóng)滯育相關(guān)蛋白分析[D]. 王滔.吉林大學(xué) 2013



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