香梨優(yōu)斑螟是新疆林果業(yè)重要害蟲之一,以老熟幼蟲在翹皮或為害處越冬,為探索香梨優(yōu)斑螟滯育期間越冬幼蟲的滯育特征,選擇抗寒性相關(guān)基因—熱激蛋白基因、脂肪酸去飽和酶基因、和其它滯育期關(guān)聯(lián)基因如精氨酸激酶、乙酰輔酶A羧化酶、脂肪酸合酶、糖原磷酸化酶、己糖激酶和氨基酸為研究對象,研究其表達或變化規(guī)律,旨在促進探究香梨優(yōu)斑螟滯育機制,為香梨優(yōu)斑螟防控提供新思路。（1）香梨優(yōu)斑螟滯育期及低溫脅迫的內(nèi)參基因篩選:在4℃低溫脅迫下香梨優(yōu)斑螟內(nèi)參基因穩(wěn)定性是UBQ>GAPDH>Actin>18s>TUB;在不同低溫脅迫1h時香梨優(yōu)斑螟內(nèi)參基因的穩(wěn)定性從大到小依次為UBQ>18s>GAPDH>Actin>TUB;在滯育過程中香梨優(yōu)斑螟內(nèi)參基因的穩(wěn)定性依次為GAPDH>18s>UBQ>TUB>Actin。香梨優(yōu)斑螟在短期溫度脅迫時可選擇UBQ作為內(nèi)參基因,滯育研究中GAPDH作為內(nèi)參基因比較理想。（2）熱激蛋白（HSP60、HSP70、HSP90）基因表達特征:4℃低溫脅迫后HSPs基因表達顯著上調(diào),1h達到最高峰值,3h后下降再上升,其... 

【文章來源】：塔里木大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

所有滯育期及不同處理的RNA電泳圖（每3個生物學(xué)重復(fù)之間隨機選取一個）

塔里木大學(xué)碩士學(xué)位論文第三章結(jié)果與分析2718sTUBActinGAPDHUBQ圖3-2內(nèi)參基因的溶解曲線Fig.3-2Dissolutioncurveofreferencegene表3-1擴增效率Table3-1PCRefficiency基因Gene線性相關(guān)系數(shù)R2Correlationcoefficient擴增效率(%)PCRefficiencyActin0.995998.77TUB0.9968105.88GAPDH0.9944110.4118s0.9886105.03UBQ0.994490.263.1.3內(nèi)參基因穩(wěn)定性分析3.1.3.1不同滯育期及處理下內(nèi)參基因的表達水平（1）不同時期香梨優(yōu)斑螟5個內(nèi)參基因不同時期的Ct值較為穩(wěn)定，變化趨勢差異不大。18s內(nèi)參基因表達豐度最高，Ct值5.87-6.89，GAPDH、Actin、TUB和UBQ基因表達豐度相對

塔里木大學(xué)碩士學(xué)位論文第三章結(jié)果與分析28較低，Ct值14.01-20.54之間,總體趨勢平穩(wěn)，無明顯的高表達或低表達現(xiàn)象(圖3-3)。圖3-3不同時期內(nèi)參基因Ct值變化趨勢Fig.3-3ChangesofCtvaluesofreferencegenesindifferentperiods（2）低溫處理不同時長香梨優(yōu)斑螟5個內(nèi)參基因在低溫處理不同時長下的Ct值也較為穩(wěn)定，但在3h和24h時出現(xiàn)幅度較大波動，相比不同時期的表達，Ct值的穩(wěn)定程度有一定下降。18s內(nèi)參基因表達豐度依然是最高，Ct值5.87-6.89，GAPDH、Actin、TUB和UBQ基因表達豐度相對18s較低，Ct值14.01-20.54之間，于24h有較明顯波動，Ct值增大，表達量降低，可能由于低溫時間過長影響mRNA(圖3-4)。圖3-4低溫處理不同時長內(nèi)參基因Ct值變化趨勢Fig.3-4ChangetrendofCtvalueofinternalreferencegeneinlowtemperaturetreatment（3）不同低溫處理香梨優(yōu)斑螟5個內(nèi)參基因在不同低溫處理下的Ct值也較為穩(wěn)定，未出現(xiàn)明顯的起伏。18s內(nèi)參基因表達豐度依然是最高，Ct值8.12-12.54，GAPDH、Actin、TUB和UBQ基因表達豐度相對18s較低，Ct值17.33-26.41之間,總體趨勢平穩(wěn)，程度間于不同時期

【參考文獻】：
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本文編號：3449289