目的:檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌組織中MAGE-D4蛋白的表達(dá)和血清中MAGE-D4抗體,并進(jìn)一步分析它們與患者臨床病理指標(biāo)之間的關(guān)系。構(gòu)建MAGE-D4真核表達(dá)質(zhì)粒,篩選基因穩(wěn)定沉默的肺癌細(xì)胞株,為后續(xù)研究MAGE-D4的生物學(xué)功能提供條件。方法:1.采用Oncomine癌基因芯片數(shù)據(jù)庫(kù)中兩個(gè)獨(dú)立的肺癌數(shù)據(jù)集Hou Lung（肺癌樣本91例,正常肺組織65例）和Okayama Lung（肺癌樣本226例,正常肺組織20例）分析MAGE-D4 mRNA的表達(dá)。2.通過(guò)免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)81例非小細(xì)胞肺癌組織和38例癌旁組織中MAGE-D4蛋白的表達(dá)及細(xì)胞定位,并分析蛋白表達(dá)的陽(yáng)性率與NSCLC患者臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。3.采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)74例非小細(xì)胞肺癌患者血清中MAGE-D4抗體的陽(yáng)性率及效價(jià),并分析其與NSCLC患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系。4.通過(guò)RT-PCR檢測(cè)3株肺癌細(xì)胞A549、H460、PC9中MAGE-D4的表達(dá)情況。使用MAGE-D4 shRNA重組慢病毒感染高表達(dá)MAGE-D4的肺癌細(xì)胞,經(jīng)過(guò)嘌呤霉素篩選,獲得穩(wěn)定沉默MAGE-D4基因的細(xì)胞株;通過(guò)RT-qPCR和... 

【文章來(lái)源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：114 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

肺癌組織芯片中MAGE-D4mRNA的表達(dá)Fig.1-1ExpressionofMAGE-D4mRNAinlungcancertissuemicroarray

21圖 1-2 免疫組織化學(xué)染色檢測(cè) MAGE-D4 蛋白（200×）Fig.1-2 MAGE-D4 protein expression tested by IHC（200×）a: negative control (paracancerous tissue)；b: expression of pre-immune serum in lung adenocarcinoma ；c: co-expression in the nucleus and cytoplasm；d: weak expression in lung adenocarcinoma；e: moderateexpression in lung adenocarcinoma；f: strong expression in adenocarcinoma; g: weak expression in lungsquamous cell carcinoma; h: moderate expression in lung squamous cell carcinoma；i: strong expression inlung squamous cell carcinoma

S 17.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析，樣本均數(shù)的使用 χ2檢驗(yàn)或 Fisher 確切概率法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)學(xué)意義。的濃度測(cè)定 蛋白定量試劑盒測(cè)定包被蛋白濃度，標(biāo)03，決定系數(shù) R2=0.9969（圖 2-1）。決定系數(shù)高的準(zhǔn)確度，可用于計(jì)算包被蛋白的濃度。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]膠質(zhì)瘤相關(guān)抗原MAGE-D4基因重組、表達(dá)特性分析及抗體血清學(xué)檢測(cè)[D]. 賀菽嘉.廣西醫(yī)科大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3448725