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Ezrin基因敲降對(duì)Ox-LDL及血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)Calpain活性、ABCA1降解及細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-10-11 21:35
  目的:Ezrin作為Ezrin-Radixin-Moesin(ERM)家族中的細(xì)胞骨架蛋白同時(shí)也是一種泛表達(dá)蛋白,研究表明Ezrin與calpain活性密切相關(guān),ABCA1蛋白是膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)的中心蛋白,calpain可以介導(dǎo)其降解。Ezrin是否在動(dòng)脈粥樣硬化形成中發(fā)揮作用尚不清楚。本研究旨在探討Ezrin基因在動(dòng)脈粥樣硬化中表達(dá)規(guī)律,進(jìn)而研究下調(diào)Ezrin表達(dá)對(duì)致動(dòng)脈粥樣硬化因素干預(yù)下巨噬細(xì)胞Calpain-1的活性、ABCA1蛋白表達(dá)及細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量影響,以期明確Ezrin在動(dòng)脈粥樣硬化形成中作用。方法:1.高脂飲食喂養(yǎng)ApoE-/-小鼠制作動(dòng)脈粥樣硬化模型,HE染色證實(shí),免疫熒光及免疫組化法檢測(cè)斑塊處Ezrin表達(dá)水平。為驗(yàn)證組織學(xué)結(jié)果,Western blotting檢測(cè)不同時(shí)間、濃度Ox-LDL、血管緊張素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)對(duì)RAW264.7細(xì)胞內(nèi)Ezrin基因表達(dá)影響。2.構(gòu)建Ezrin基因小干擾RNA(siRNA),通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染導(dǎo)入RAW264.7細(xì)胞中,RT-PCR,Western blotting法檢測(cè)RAW264.7細(xì)... 

【文章來源】:貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】:52 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

Ezrin基因敲降對(duì)Ox-LDL及血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)Calpain活性、ABCA1降解及細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量的影響


小鼠主動(dòng)脈組織染色結(jié)果(HE,×200)

免疫熒光染色,高脂飲食,動(dòng)脈粥樣斑塊,血管內(nèi)膜


a:普通飲食;b:高脂飲食圖 2-2 小鼠主動(dòng)脈免疫熒光染色結(jié)果Fig. 2-2 Ezrin expression in mice atherosclerotic plaques (Immunofluorescenc,×200)同時(shí),對(duì)兩組動(dòng)脈切片,進(jìn)行免疫組化檢測(cè),再次驗(yàn)證Ezrin 表達(dá)水平,結(jié)果證實(shí),相比較普通飲食組血管內(nèi)膜,高脂飲食組動(dòng)脈粥樣斑塊內(nèi)可見內(nèi)皮下及泡沫細(xì)胞上Ezrin 表達(dá)上調(diào),呈現(xiàn)片狀棕色顆粒(光密度值:49.25±3.75 vs 8.12±2.16,P<0.05,圖 2-3 )。

免疫組化,高脂飲食,動(dòng)脈粥樣斑塊,血管內(nèi)膜


a:普通飲食;b:高脂飲食圖 2-2 小鼠主動(dòng)脈免疫熒光染色結(jié)果Fig. 2-2 Ezrin expression in mice atherosclerotic plaques (Immunofluorescenc,×200)同時(shí),對(duì)兩組動(dòng)脈切片,進(jìn)行免疫組化檢測(cè),再次驗(yàn)證Ezrin 表達(dá)水平,結(jié)果證實(shí),相比較普通飲食組血管內(nèi)膜,高脂飲食組動(dòng)脈粥樣斑塊內(nèi)可見內(nèi)皮下及泡沫細(xì)胞上Ezrin 表達(dá)上調(diào),呈現(xiàn)片狀棕色顆粒(光密度值:49.25±3.75 vs 8.12±2.16,P<0.05,圖 2-3 )。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3431276

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