研究背景:KRAS 是胰腺導(dǎo)管腺癌（Pancreatic Ductal Adenocarcinoma,PDAC）中最常突變的癌基因（～95%）。該基因位點(diǎn)的突變對(duì)于人類和小鼠的胰腺腫瘤起始和發(fā)展是至關(guān)重要的。研究曾報(bào)道野生型Kras等位基因在PDAC小鼠模型（p16flox/flox;LSL-KrasG12D;Pdxl-Cremice）的原位癌和轉(zhuǎn)移灶均發(fā)生了缺失,并且在轉(zhuǎn)移灶缺失野生型KRAS等位基因的缺失頻率顯著高于原位腫瘤。然而,野生型KRAS等位基因缺失的機(jī)制,以及其在胰腺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的功能尚不明確。研究目的:1、探索野生型KRAS等位基因在胰腺腫瘤發(fā)生發(fā)展中的功能。2、探索野生型KRAS等位基因在胰腺癌細(xì)胞中對(duì)下游分子信號(hào)通路調(diào)控的機(jī)制。研究方法:1、選取已發(fā)生野生型KRAS等位基因缺失的人源胰腺癌細(xì)胞系（MIAPaCa-2,AsPC-1）,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染野生型KRAS等位基因,并可由強(qiáng)力霉素（Doxycycline,Dox）誘導(dǎo)其目的基因表達(dá)的質(zhì)粒,獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系（iWTKRASMIAPaCa-2,iWTKRASAsPC-1）。2、通過(guò)3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-... 

【文章來(lái)源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：115 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．?ＸＣｅｌｌ?ＩＩ？?Ｂｌｏｔ?Ｍｏｄｕｌｅ轉(zhuǎn)膜儀使用示意圖??

（〇Ｈｇ／ｍｌ、ｌ＾ｉｇ／ｍｌ、２ｐ＿ｇ／ｍｌ）嘗試下，２ｐｇ／ｍｌＤｏｘ對(duì)野生型ＫＲＡＳ等位的誘導(dǎo)效??果最佳。經(jīng)過(guò)該實(shí)驗(yàn)，２ｆｉｇ／ｍ丨被選擇為Ｄｏｘ誘導(dǎo)野生型ＫＲＡＳ表達(dá)的最終工作??液濃度（圖２）。??４０??

Ｒ顯示在誘導(dǎo)野生型ＫＲＡＳ表達(dá)的情況下，內(nèi)源性突變型Ｋ解Ｄｏｘ誘導(dǎo)野生型ＫＲＡＳ等位基因表達(dá)的時(shí)間條件，我們ｏｘ?對(duì)?ｉＷＴ?ＫＲＡＳ?ＭＩＡＰａＣａ－２?和?ｉＷＴ?ＫＲＡＳ?ＡｓＰＣ－１?細(xì)胞系（〇、２、４、８、２４小時(shí)）的加藥處理，并通過(guò)Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ位基因表達(dá)水平。整合在野生型ＫＲＡＳ?ｃＤＮＡ上的－ＨＡ標(biāo)誘導(dǎo)表達(dá)的野生型ＫＲＡＳ等位基因。如圖４所示，經(jīng)２４

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Growth inhibitory effect of wild-type Kras2 gene on a colonic adenocarcinoma cell line[J]. Hong Li, Hou-Fa Cao, Inpatient Department of Medical Health Center, Chinese PLA General Hospital, Beijing 100853, China Jun Wan, Yuan Li, Mei-Ling Zhu, Department of Nanlou Digestion, Chinese PLA General Hospital , Beijing 100853, China Po Zhao, Department of Pathology, Chinese PLA General Hospital, Beijing 100853, China.  World Journal of Gastroenterology. 2007(06)
[2]姜黃素對(duì)K562細(xì)胞增殖的抑制作用與其下調(diào)p210bcr/abl激活的Ras信號(hào)途徑有關(guān)（英文）[J]. 吳麗賢,許建華,吳國(guó)華,陳元仲.  Acta Pharmacologica Sinica. 2003(11)



本文編號(hào)：3427020