目的:本研究目的為研究人卵丘顆粒細(xì)胞（cumulus cells,CCs）中ADAMTS1與HSPG2的表達(dá)情況是否與卵母細(xì)胞質(zhì)量有關(guān),能否作為預(yù)測(cè)體外受精-胚胎移植臨床結(jié)局的潛在生物標(biāo)志物。方法:本研究分為三部分內(nèi)容:第一部分為野生型C57BL/6小鼠上進(jìn)行的動(dòng)物實(shí)驗(yàn),我們收集了注射人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,h CG）后不同時(shí)間點(diǎn)（0h,4h,8h,12h及16h）的CCs,進(jìn)行RNA提取、逆轉(zhuǎn)錄和RT-PCR,檢測(cè)了ADAMTS1與HSPG2在整個(gè)排卵過(guò)程中的表達(dá)模式,并利用si RNA技術(shù)干擾ADAMTS1后檢測(cè)HSPG2的表達(dá)變化,從而研究?jī)烧呖赡艿年P(guān)系。第二部分為基于人類標(biāo)本的研究,我們收集了共148名（45名多囊卵巢綜合癥患者及103名輸卵管性因素或男方因素）進(jìn)行IVF/ICSI患者的CCs進(jìn)行目的基因m RNA表達(dá)情況的檢測(cè),并統(tǒng)計(jì)了每一位病人的獲卵數(shù)、成熟卵數(shù)、受精率、可移植胚胎率、優(yōu)胚率、有無(wú)著床等臨床數(shù)據(jù),最后統(tǒng)計(jì)分析得出多囊卵巢綜合征組及正常排卵組中ADAMTS1與HSPG2的表達(dá)情況、臨床結(jié)局的差異。第三部分對(duì)... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

卵巢內(nèi)卵泡發(fā)育過(guò)程

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文正文第一章緒論3卵母細(xì)胞成熟后以MII期卵母細(xì)胞的形式和周邊的卵丘顆粒細(xì)胞一同被排出，受精后完成第二次減數(shù)分裂。因而，通常意義上，生理狀態(tài)下正常排出了第一極體的MII期卵母細(xì)胞是成熟卵，也叫MII期卵，具有受精能力。1.1.3卵丘擴(kuò)展和細(xì)胞外基質(zhì)重塑哺乳動(dòng)物排卵前，卵母細(xì)胞成熟伴隨著卵丘擴(kuò)展，在LH與卵泡刺激素（folliclestimulatinghormone，F(xiàn)SH）的作用下卵丘顆粒細(xì)胞可以分泌并集聚多糖基質(zhì)，其主要成分是透明質(zhì)酸。如圖1.2所示，在積聚的透明質(zhì)酸的作用下，卵丘顆粒細(xì)胞分離擴(kuò)散。當(dāng)卵子與精子相遇，精子釋放的透明質(zhì)酸酶會(huì)使卵丘顆粒細(xì)胞脫落，進(jìn)行后續(xù)的受精過(guò)程。細(xì)胞外基質(zhì)（extracellularmatrix，ECM）重塑是卵泡破裂排卵過(guò)程中其中關(guān)鍵作用的一步，其特征是ECM成分的局部降解，這些成分包括versican、層粘連蛋白、IV型膠原、perlecan和纖維蛋白等[3,9-13]。細(xì)胞外基質(zhì)重塑貫穿于整個(gè)排卵過(guò)程。成功的排卵過(guò)程需要精確的ECM重塑來(lái)確保卵泡破裂[12,14-17]，而卵母細(xì)胞與卵丘顆粒細(xì)胞、壁層顆粒細(xì)胞及其他細(xì)胞之間的密切聯(lián)系及相互作用是這一過(guò)程的基矗圖1.2卵丘擴(kuò)展前后COC圖

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文正文第一章緒論41.1.4卵母細(xì)胞與卵丘顆粒細(xì)胞的關(guān)系卵丘顆粒細(xì)胞作為緊緊圍繞在卵母細(xì)胞周圍的細(xì)胞，它可以通過(guò)縫隙連接及旁分泌途徑對(duì)卵母細(xì)胞產(chǎn)生重大影響，卵丘顆粒細(xì)胞在竇前卵泡階段促進(jìn)卵母細(xì)胞生長(zhǎng)、竇卵泡階段維持卵母細(xì)胞減數(shù)分裂阻滯狀態(tài)、卵母細(xì)胞成熟階段影響卵母細(xì)胞減數(shù)分裂恢復(fù)，促進(jìn)卵母細(xì)胞mRNA翻譯，以及為卵母細(xì)胞提供各階段必須的代謝小分子等方面發(fā)揮作用[18-20]。另一方面，卵母細(xì)胞也通過(guò)旁分泌因子（oocytesecretefactors，OSFs）對(duì)卵丘顆粒細(xì)胞的增殖、凋亡與抗凋亡、拮抗黃素化作用、卵丘擴(kuò)展等方面進(jìn)行調(diào)節(jié)[16,18,21,22]。在整個(gè)卵泡發(fā)育過(guò)程中，卵母細(xì)胞與卵丘顆粒細(xì)胞互相調(diào)節(jié)。以排卵過(guò)程為例，如圖1.3所示[23]，在LH、FSH等多個(gè)分子及信號(hào)通路影響下，卵丘顆粒細(xì)胞及壁層顆粒細(xì)胞分泌相應(yīng)的金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1(adisintegrinandmetalloproteasewiththrombospondintype1motif1，ADAMTS1)、versican等成分，卵母細(xì)胞也分泌包括生長(zhǎng)分化因子9（growthdifferentiationfactor9，GDF9）、骨形態(tài)發(fā)生蛋白15（bonemorphogeneticprotein15，BMP15）在內(nèi)的相關(guān)因子并作用于卵丘顆粒細(xì)胞，最終在各種因子的影響下卵母細(xì)胞被排出卵泡，與之類似，卵母細(xì)胞的各階段情況都在卵丘顆粒細(xì)胞上留下了如信號(hào)通路改變、基因表達(dá)情況變化等印記[2,19,24-28]。圖1.3排卵的信號(hào)通路及介質(zhì)

【參考文獻(xiàn)】：
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