AP-1是細(xì)胞增殖和分化的重要轉(zhuǎn)錄因子,在動(dòng)物免疫、發(fā)育等方面發(fā)揮著重要作用。本研究采用RACE方法克隆了青海湖裸鯉AP-1基因的c DNA全長(zhǎng)序列,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR探究了其在不同組織中的表達(dá)情況。結(jié)果顯示,青海湖裸鯉AP-1的cDNA序列全長(zhǎng)為1 832 bp,CDS區(qū)918 bp,共編碼305個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)該蛋白的分子量為33.69 kD,等電點(diǎn)9.20。系統(tǒng)進(jìn)化結(jié)果顯示青海湖裸鯉與犀角金線鲃?dòng)休^高的同源性。蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)顯示該基因編碼的蛋白C端具有一個(gè)典型的堿性區(qū)和一個(gè)高度保守的亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu),該結(jié)構(gòu)能與DNA相結(jié)合。qRT-PCR結(jié)果表明,AP-1基因在肌肉、肝臟、鰓、心、腎、腦、腸和脾臟中均有表達(dá)。在肌肉中具有最高表達(dá)量（p<0.01）,其次為肝臟和鰓（p<0.01）,在脾臟中表達(dá)量最低。本研究為進(jìn)一步了解青海湖裸鯉AP-1基因的功能提供了數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。 

【文章來(lái)源】：基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2020,39(07)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【部分圖文】：

AP-1蛋白的三級(jí)結(jié)構(gòu)

實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示，該基因在肌肉、肝臟、鰓、心、腦、腸、腎和脾臟中都有表達(dá)，表達(dá)具有普遍性。吳冰等(2014)在對(duì)凡納濱對(duì)蝦進(jìn)行研究時(shí)，得出結(jié)論AP-1表達(dá)于多種組織中，不存在組織表達(dá)的特異性，且具有普遍的表達(dá)性。但在不同的組織中其表達(dá)量不同，在肌肉中表達(dá)量最高，脾臟中表達(dá)量最低。Baresic等(2014)研究表明，AP-1含有的JUN和ATF蛋白復(fù)合物在肌肉細(xì)胞中的表達(dá)量是最高的，激活蛋白1復(fù)合物(AP-1)在肌肉中的高表達(dá)對(duì)于過(guò)氧化物酶體增殖激活受體輔激活因子1 (PGC-1)調(diào)控缺氧反應(yīng)基因起到重要作用，AP-1與PGC-1的相互作用對(duì)缺氧反應(yīng)起到協(xié)同作用，該基因缺失會(huì)降低PGC-1對(duì)靶基因的正向調(diào)控能力。因此，表明AP-1基因在肌肉中表達(dá)量較高，這與本實(shí)驗(yàn)得出的AP-1基因在肌肉中的表達(dá)量是最高的結(jié)論一致。也有研究表明，AP-1基因在青蛤5個(gè)組織中的表達(dá)時(shí)，得出在閉殼肌中該基因的表達(dá)量排第二，是比較高的，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果也有相似之處(丁丹等,2018)。Zoysa等(2010)在研究鮑魚免疫相關(guān)基因的表達(dá)時(shí)，檢測(cè)出AP-1在肌肉和鰓中有高表達(dá)量，這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致。AP-1是與免疫相關(guān)的基因，本研究中AP-1基因在鰓中的表達(dá)量比較高，而在脾臟中的表達(dá)量相對(duì)較低。因此，推測(cè)AP-1在青海湖裸鯉中可能只參與了部分免疫過(guò)程。圖5 基于青海湖裸鯉AP-1氨基酸序列的系統(tǒng)進(jìn)化樹

基于青海湖裸鯉AP-1氨基酸序列的系統(tǒng)進(jìn)化樹

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]《轉(zhuǎn)錄因子JunB/AP-1調(diào)節(jié)多發(fā)性骨髓瘤在骨髓微環(huán)境中的細(xì)胞增殖與耐藥》解讀[J]. 范鳳娟,江沁月,孫春艷,胡豫.  臨床血液學(xué)雜志. 2018(04)
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[3]青蛤（Cyclina sinensis）AP-1基因的克隆及在鰻弧菌（Vibrio anguillarum）侵染下的表達(dá)分析[J]. 丁丹,潘寶平,王玉梅,侯梓園,閆春財(cái).  海洋與湖沼. 2018(01)
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