植物細(xì)菌性青枯�。╞acterial wilt of plants）是由茄科雷爾氏菌（Ralstonia solanacearum Yabuuchi et al.,簡稱青枯菌）引起的一種重要土傳病害。國內(nèi)外研究表明,青枯菌在脅迫條件下可進(jìn)入活的非可培養(yǎng)狀態(tài)（viable but non-culturable,VBNC）。雖然國內(nèi)外已在硫酸銅、低溫、高溫誘導(dǎo)青枯菌VBNC狀態(tài)以及青枯菌VBNC檢測方面取得進(jìn)展,但尚未解析轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子RpoS與青枯菌VBNC的聯(lián)系以及在致病進(jìn)程中發(fā)揮的作用,也未建立適用青枯菌所有小種的PMA-qPCR檢測體系。本研究以青枯菌生姜分離菌株Z-Aq-1（以下簡稱Aq菌株）為研究對象,采用生物信息學(xué)、植物病理學(xué)、分子生物學(xué)和反向遺傳學(xué)等研究手段,構(gòu)建精準(zhǔn)高效的青枯菌活細(xì)胞檢測技術(shù)體系,探明青枯菌VBNC狀態(tài)形成與復(fù)蘇的誘導(dǎo)因子,解析轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子RpoS與青枯菌可培養(yǎng)/非可培養(yǎng)狀態(tài)間轉(zhuǎn)換、致病性等生物學(xué)表型間的內(nèi)在關(guān)聯(lián)。旨在為病害早期診斷及病害流行學(xué)規(guī)律研究提供技術(shù)支撐,為揭示VBNC狀態(tài)在青枯病侵染循環(huán)中的作用提供科學(xué)依據(jù)。1.PMA-qPCR定量檢測青枯活菌方... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

中國青枯菌的地理分布（jiangetal.,2017）

直接被青枯菌作為營養(yǎng)代謝底物，使得青枯菌在土壤、水體或者田間無癥雜草的根際周圍以腐生方式長期存活，并藉此隨土壤和水流傳播（Genin and Denny, 2012; Schell, 2000）。圖1.2 青枯菌侵染循環(huán)（Genin, 2010）Fig.1.2 Infection cycle of R. solanacearum (Genin, 2010)青枯菌侵染寄主植物的過程和機(jī)理，前人的研究已比較清楚，但青枯菌在土壤中的生存狀態(tài)尚未揭示，這對于土傳病害青枯病的防控造成了一定的困擾，本實(shí)驗(yàn)室前期試驗(yàn)研究表明，以發(fā)病地塊土壤總DNA為檢測靶標(biāo)，采用青枯菌特異性引物759F/760R進(jìn)行PCR擴(kuò)增后，部分檢測結(jié)果呈陽性。而從土壤的懸浮液中通過選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行涂板卻很難分離出青枯菌的菌落，以此我們推測青枯菌在土壤環(huán)境中可能進(jìn)入非可培養(yǎng)狀態(tài)，并于該狀態(tài)下長期存活。1.2 細(xì)菌 VBNC 狀態(tài)的特征、誘導(dǎo)和復(fù)蘇上節(jié)內(nèi)容中，我們提到了青枯菌可能會以一種非可培養(yǎng)狀態(tài)在土壤環(huán)境長期存活。而大量的研究表明

1.3 VBNC狀態(tài)誘導(dǎo)、復(fù)蘇示意圖（Ayrapetyan and Oliver, c diagram of the induction and resuscitation for VBNC (Ayrape下，一個細(xì)菌群體（紅色代表 VBNC 細(xì)胞，綠色代表可培養(yǎng)細(xì)胞）隨（實(shí)線），然而一大部分不可培養(yǎng)的活細(xì)胞仍然存活（虛線）；當(dāng)把頭），在適宜的生長條件下，可培養(yǎng)細(xì)胞不斷增殖，最終又形成一個次報道以來，VBNC 研究主要集中在食品科學(xué)、BNC 的研究則相對較少。目前已知 85 種細(xì)菌存在種為革蘭氏陽性菌，8 種為革蘭氏陰性菌，具體如下表1.7 已報道VBNC狀態(tài)的植物病原細(xì)菌Table 1.7 Plant pathogenic bacteria has been reported VBN中文名Chinese name拉丁學(xué)名Latin name密執(zhí)安棒狀桿菌密執(zhí)安亞種Clavibacter michiganensissubsp. michiganensis野油菜黃單胞菌野油菜致病變種Xanthomonas campestris pv.campestris

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]番茄潰瘍病菌VBNC狀態(tài)的誘導(dǎo)、復(fù)蘇及機(jī)制研究[D]. 蔣娜.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]大腸桿菌碳源代謝及氧化應(yīng)答與自然遺傳轉(zhuǎn)化的相關(guān)性研究[D]. 郭萌月.武漢大學(xué) 2015
[3]RpoS在大腸桿菌自然遺傳轉(zhuǎn)化中的功能研究[D]. 張研.武漢大學(xué) 2013

碩士論文
[1]青枯菌LAMP檢測方法的建立及植物精油抑菌活性評價[D]. 黃雯.西南大學(xué) 2017
[2]青枯菌copSRABCD抗銅基因簇的功能研究[D]. 胡小梅.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[3]土壤青枯菌群體的動態(tài)消漲規(guī)律與分子檢測方法研究[D]. 于小龍.天津農(nóng)學(xué)院 2015



本文編號：3383693