4種實時熒光PCR試劑在大米轉(zhuǎn)基因檢測中的應(yīng)用比較
發(fā)布時間:2021-08-13 06:00
本文比較評價了4種熒光PCR試劑在大米轉(zhuǎn)基因檢測中的應(yīng)用效果,篩選出最適合轉(zhuǎn)基因成分檢測的試劑,并建立相關(guān)檢測方法體系。將同一大米樣品提取的核酸做5個濃度梯度,用4種不同品牌的熒光探針PCR試劑同時擴增大米內(nèi)源Gos9基因,分析4種試劑檢測結(jié)果的差異和相關(guān)性。4種試劑對目標(biāo)基因均有特異性擴增,模板量最高(250 ng)時,編號為Ti的試劑擴增的Ct值最。23.36),Bi是25.19,Pr和Ta差異不明顯(分別為27.76和27.35);當(dāng)模板量為25 pg時,編號為Bi的試劑擴增的Ct值最。35.45),其余分別為Ta(37.85)、Ti(35.85)和Pr(42.26)。由結(jié)果可以看出,Bi試劑的擴增效率、靈敏度和穩(wěn)定性都優(yōu)于其他試劑,特別是在模板量濃度低的情況下檢測結(jié)果最佳。不同試劑對相同模板的擴增效率不同,綜合評價得出Bi試劑的穩(wěn)定性、靈敏度和準(zhǔn)確度在4種試劑中最好,可穩(wěn)定用于大米及其加工產(chǎn)品的轉(zhuǎn)基因檢測。
【文章來源】:中國口岸科學(xué)技術(shù). 2020,(07)
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
引言
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 轉(zhuǎn)基因大米樣品
1.1.2 試劑和儀器
1.1.3 引物和探針
1.2 方法
1.2.1 大米基因組DNA提取
1.2.2 模板DNA準(zhǔn)備
1.2.3 實時熒光PCR擴增
2 結(jié)果與分析
2.1 實時熒光PCR對大米Gos9基因的擴增結(jié)果
2.2 實時熒光PCR結(jié)果對轉(zhuǎn)基因檢測影響的分析
3 討論
4 結(jié)論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]2018年全球生物技術(shù)/轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化發(fā)展態(tài)勢[J]. International Service for the Acquisition of Agri-biotech Applications China Biotechnology;. 中國生物工程雜志. 2019(08)
[2]轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品成分檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 王顥潛,陳銳,李夏瑩,王夢雨,劉鵬程. 生物技術(shù)通報. 2018(03)
[3]轉(zhuǎn)基因水稻B2A68事件特異性檢測方法的建立[J]. 蔣利平,翁綠水,肖國櫻. 雜交水稻. 2013(05)
[4]轉(zhuǎn)基因水稻檢測用陽性質(zhì)粒分子的構(gòu)建及應(yīng)用[J]. 李曉飛,譚小力,李俊,武玉花,曹應(yīng)龍. 生物技術(shù)通報. 2013(07)
[5]轉(zhuǎn)植酸酶基因(phyA2)玉米定性、定量PCR檢測[J]. 于彩虹,田少亭,路興波,李凡,楊淑珂,孫紅煒. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2012(04)
[6]轉(zhuǎn)基因大豆MON89788轉(zhuǎn)化體特異性定性PCR檢測(摘要)(英文)[J]. 李飛武,李蔥蔥,董立明,邢珍娟,張明. Agricultural Science & Technology. 2010(03)
[7]熒光PCR方法定性和定量檢測BT63轉(zhuǎn)基因大米[J]. 趙衛(wèi)東,鄭文杰,賀艷. 食品研究與開發(fā). 2009(03)
[8]轉(zhuǎn)基因豆粕中內(nèi)源基因和外源基因檢測方法的建立[J]. 于忠娜,苗向陽,單虎,李建霞,丁兆忠. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2008(02)
[9]實時熒光定量PCR技術(shù)在轉(zhuǎn)基因玉米檢測中的應(yīng)用研究[J]. 陳穎,徐寶梁,蘇寧,葛毅強,王曙光. 作物學(xué)報. 2004(06)
[10]PCR法定性檢測食用油脂中轉(zhuǎn)基因成分[J]. 覃文,董潔,鄧鴻鈴,高東微. 中國油脂. 2002(02)
本文編號:3339893
【文章來源】:中國口岸科學(xué)技術(shù). 2020,(07)
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
引言
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 轉(zhuǎn)基因大米樣品
1.1.2 試劑和儀器
1.1.3 引物和探針
1.2 方法
1.2.1 大米基因組DNA提取
1.2.2 模板DNA準(zhǔn)備
1.2.3 實時熒光PCR擴增
2 結(jié)果與分析
2.1 實時熒光PCR對大米Gos9基因的擴增結(jié)果
2.2 實時熒光PCR結(jié)果對轉(zhuǎn)基因檢測影響的分析
3 討論
4 結(jié)論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]2018年全球生物技術(shù)/轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化發(fā)展態(tài)勢[J]. International Service for the Acquisition of Agri-biotech Applications China Biotechnology;. 中國生物工程雜志. 2019(08)
[2]轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品成分檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 王顥潛,陳銳,李夏瑩,王夢雨,劉鵬程. 生物技術(shù)通報. 2018(03)
[3]轉(zhuǎn)基因水稻B2A68事件特異性檢測方法的建立[J]. 蔣利平,翁綠水,肖國櫻. 雜交水稻. 2013(05)
[4]轉(zhuǎn)基因水稻檢測用陽性質(zhì)粒分子的構(gòu)建及應(yīng)用[J]. 李曉飛,譚小力,李俊,武玉花,曹應(yīng)龍. 生物技術(shù)通報. 2013(07)
[5]轉(zhuǎn)植酸酶基因(phyA2)玉米定性、定量PCR檢測[J]. 于彩虹,田少亭,路興波,李凡,楊淑珂,孫紅煒. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2012(04)
[6]轉(zhuǎn)基因大豆MON89788轉(zhuǎn)化體特異性定性PCR檢測(摘要)(英文)[J]. 李飛武,李蔥蔥,董立明,邢珍娟,張明. Agricultural Science & Technology. 2010(03)
[7]熒光PCR方法定性和定量檢測BT63轉(zhuǎn)基因大米[J]. 趙衛(wèi)東,鄭文杰,賀艷. 食品研究與開發(fā). 2009(03)
[8]轉(zhuǎn)基因豆粕中內(nèi)源基因和外源基因檢測方法的建立[J]. 于忠娜,苗向陽,單虎,李建霞,丁兆忠. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2008(02)
[9]實時熒光定量PCR技術(shù)在轉(zhuǎn)基因玉米檢測中的應(yīng)用研究[J]. 陳穎,徐寶梁,蘇寧,葛毅強,王曙光. 作物學(xué)報. 2004(06)
[10]PCR法定性檢測食用油脂中轉(zhuǎn)基因成分[J]. 覃文,董潔,鄧鴻鈴,高東微. 中國油脂. 2002(02)
本文編號:3339893
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